DPBS vs PBS
PBS alebo fosfátom pufrovaný fyziologický roztok a Dulbeccov fosfátom pufrovaný fyziologický roztok (DPBS) sú pufrované fyziologické roztoky používané v biologických štúdiách. PBS a DPBS sa používajú pri výskume, ktorý sa týka buniek. Koncentrácia iónov a osmolarita roztoku je izotonická, to znamená, že je kompatibilná s ľudským telom. Pufr uľahčuje poskytnutie a zachovanie stabilného pH 7,2 až 7,6.
Medzi PBS a DPBS nie je žiadny významný rozdiel. Obidve obsahujú fosforečnan sodný, chlorid sodný av prípade potreby fosforečnan draselný a chlorid draselný. Iné prípravky, ako napríklad DPBS, môžu alebo nemusia obsahovať vápnik a horčík. PBS a DPBS majú početné aplikácie, pretože nie sú škodlivé pre bunky. PBS aj DPBS sa môžu použiť na prepláchnutie nástrojov alebo nádob kontaminovaných bunkami. Obidve sa tiež môžu použiť v riediacich látkach. Molekuly vody v riedidlách, ako je proteín, sa zastavia a vysušia. Voda, ktorá sa kombinuje s látkou, bráni látke podstúpiť konformačné zmeny, ako je denaturácia. Roztoky vápnika a horčíka môžu obmedzovať aktivitu trypsínu. V elipsometrii sa adsorpcia proteínu môže merať pomocou základného spektra s použitím PBS.
Na oddelenie zviazaných buniek sa môže použiť fyziologický roztok pufrovaný fosfátmi s prísadami, ako je EDTA. Precipitácia sa vytvorí, keď sa do PBS pridá zinok, dvojmocný kov, a preto sa nemôže pridať do odpojených buniek. V tomto type situácie sa namiesto zinku používa nárazník dobra.
Fosforečnanom tlmený fyziologický roztok a Dulbeccovým fosfátom tlmený fyziologický roztok sa pripravujú mnohými spôsobmi. Jedným zo spôsobov, ako ho pripraviť, je rozpustenie 800 g. chlorid sodný, 20 g. chlorid draselný, 2 molekuly vody, 24 g. fosforečnan draselný a 144 g. fosforečnan sodný v 8 litroch destilovanej vody. Výsledkom bude 10 litrov 10x PBS. Pri príprave tlmivých roztokov priamo zmerajte pH PBS pomocou pH metra. PH roztoku sa nastaví pomocou hydroxidu sodného alebo kyseliny chlorovodíkovej. Fosforečnanový tlmivý roztok ako riedidlo sa pripraví s konečnou koncentráciou 10 mM fosforečnanu, 137 mM chloridu sodného, 2,7 mM chloridu draselného a pH 7,4. Fritsch, Sambrook a Maniatis majú vlastnú cestu pri príprave tlmivých roztokov vo svojej knihe s názvom „Molekulárne klonovanie“. Preto na liter 1 x PBS začnite s prípravou 800 ml. destilovanej vody. Zahrnúť 8 g. chloridu sodného, ako aj 0,2 g. chloridu draselného. 1,44 g. fosforečnanu sodného a potom 0,24 g. fosforečnanu draselného. Pridá sa kyselina chlorovodíková na úpravu pH na 7,4. Na doplnenie 1 litra PBS pridajte viac destilovanej vody až do vyrovnania na 1 liter. Výsledný roztok sa rozdelí na alikvotnú časť a sterilizuje sa v autokláve. Upravte autokláv na 121 ° C a autoklávujte ho počas 20 minút v kvapalnom cykle. Potom sa roztok uloží pri izbovej teplote.
Aj keď je fosfátom pufrovaný soľný roztok a Dulbeccov fosfátový tlmivý soľný roztok pripravený mnohými spôsobmi, obsah je stále rovnaký. Preto, bez ohľadu na to, ako sa pripravuje, výsledky a použitia sú stále rovnaké.
Zhrnutie:
1.PBS alebo fosfátom pufrovaný fyziologický roztok a Dulbeccov fosfátom pufrovaný fyziologický roztok (DPBS) sú pufrované fyziologické roztoky používané v biologických štúdiách.
2. Koncentrácia iónov a osmolarita roztoku je izotonická, to znamená, že je kompatibilná s ľudským telom. Pufr uľahčuje poskytnutie a zachovanie stabilného pH 7,2 až 7,6.
3. Medzi PBS a DPBS nie je žiadny významný rozdiel. Obidve obsahujú fosforečnan sodný, chlorid sodný av prípade potreby fosforečnan draselný a chlorid draselný. Iné prípravky, ako napríklad DPBS, môžu alebo nemusia obsahovať vápnik a horčík.
4. PBS a DPBS sa môžu použiť na prepláchnutie nástrojov alebo nádob kontaminovaných bunkami. Obidve sa tiež môžu použiť v riediacich látkach. Molekuly vody v riedidlách, ako je proteín, sa zastavia a vysušia. Voda, ktorá sa kombinuje s látkou, bráni látke podstúpiť konformačné zmeny, ako je denaturácia. Roztoky vápnika a horčíka môžu obmedzovať aktivitu trypsínu. V elipsometrii sa adsorpcia proteínu môže merať pomocou základného spektra s použitím PBS.
5. Na oddelenie zviazaných buniek sa môže použiť fyziologický roztok pufrovaný fosfátmi s prísadami, ako je EDTA. Precipitácia sa vytvorí, keď sa do PBS pridá zinok, dvojmocný kov, a preto sa nemôže pridať do odpojených buniek. V tomto type situácie sa namiesto zinku používa nárazník dobra.
6.PBS a DPBS sa pripravujú mnohými spôsobmi. Aj keď je fosfátom pufrovaný soľný roztok a Dulbeccov fosfátový tlmivý soľný roztok pripravený mnohými spôsobmi, obsah je stále rovnaký. Preto, bez ohľadu na to, ako sa pripravuje, výsledky a použitia sú stále rovnaké.