Rozdiel medzi amplifikáciou génu a klonovaním génu

kľúčový rozdiel medzi amplifikáciou génu a klonovaním génu je to, že Génová amplifikácia je proces výroby mnohých kópií požadovaného génu in vitro polymerázovou reťazovou reakciou. Klonovanie génov je proces výroby mnohých kópií požadovaného génu in vivo vytvorením rekombinantného plazmidu a jeho transformáciou na hostiteľskú baktériu.

Gén je špecifický fragment DNA, ktorý kóduje proteín. Organizmus má tisíce génov. Ďalej je možné množiť DNA sekvencie dôležitých génov pomocou molekulárno-biologických techník. Génová amplifikácia a klonovanie génov sú dva takéto postupy. Pri obidvoch postupoch vzniká veľa kópií génu, o ktorý je záujem. Existuje však rozdiel medzi génovou amplifikáciou a klonovaním génov z hľadiska ich metodológie.

OBSAH

1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je zosilnenie génu
3. Čo je klonovanie génov
4. Podobnosti medzi zosilnením génu a klonovaním génu
5. Porovnanie bok po boku - zosilnenie génov vs klonovanie génov v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie

Čo je zosilnenie génu?

Génová amplifikácia je proces vytvárania kópií konkrétneho génu pomocou polymerázovej reťazovej reakcie. Na amplifikáciu génu by sa mala DNA daného organizmu extrahovať pomocou vhodného extrakčného protokolu DNA. Potom by extrahovaná dvojreťazcová DNA mala byť denaturovaná, aby sa získali oddelené jednotlivé vlákna. Ďalší krok zahŕňa použitie reakcie PCR na vytvorenie kópií požadovaného génu. Ďalej zmes PCR obsahuje požadované priméry, nukleotidy, enzým DNA polymeráza, templátovú DNA a ďalšie zložky. Na konci programu PRC sa uskutoční amplifikácia požadovaného génu.

Obrázok 01: Amplifikácia génu

Génová amplifikácia je okrem toho počiatočným krokom pri detekcii špecifickej sekvencie, identifikácie organizmu, diagnostikovaní chorôb a vytváraní génových knižníc atď..

Čo je klonovanie génov?

Klonovanie génov je metóda v genetickom inžinierstve na výrobu génových knižníc alebo na vytvorenie mnohých kópií požadovaného génu. Tento proces zahŕňa výrobu rekombinantného plazmidu a transformáciu rekombinantného plazmidu na hostiteľskú bunku, najmä bakteriálnu bunku. Klon je identická kópia pôvodného organizmu alebo molekuly. Klonovanie génov môže vytvoriť tisíce génových klonov.

Obrázok 02: Klonovanie génov

Akonáhle je gén, o ktorý je záujem, identifikovaný, môže byť oddelený od genómu konkrétneho organizmu jeho obmedzením špecifickými reštrikčnými enzýmami. Potom s použitím rovnakého reštrikčného enzýmu by sa plazmidy (vektory) mali otvoriť, aby sa vložil génový fragment. Rekombinantný plazmid sa potom transformuje na hostiteľskú baktériu pomocou rôznych metód, ako je elektroporácia. Niektoré z rekombinantných plazmidov vstupujú do hostiteľských bakteriálnych buniek. Transformované baktérie môžu byť pomocou antibiotika vybrané, izolované a pestované v čerstvom médiu. Táto technika teda pomáha získať milióny génov klonov.

Aké sú podobnosti medzi zosilnením génu a klonovaním génu?

• Génová amplifikácia a klonovanie génov sú dve techniky molekulárnej biologie.
• V obidvoch týchto technikách sa konkrétna sekvencia DNA alebo gén násobí miliónkrát alebo tisíckrát.
• Okrem toho sú obe techniky nanajvýš dôležité pre mnohé vedecké oblasti.

Aký je rozdiel medzi amplifikáciou génu a klonovaním génu?

Génová amplifikácia je proces, pri ktorom sa vytvárajú kópie konkrétneho génu in vitro metóda nazývaná PCR. Na druhej strane, klonovanie génov je proces, pri ktorom sa vytvárajú kópie konkrétneho génu in vivo metóda pomocou konštrukcie rekombinantných vektorov a ich množením v živom organizme. Toto je kľúčový rozdiel medzi amplifikáciou génu a klonovaním génu. Okrem toho génová amplifikácia trvá iba niekoľko hodín, kým klonovanie génov trvá niekoľko dní. Preto to môžeme považovať aj za rozdiel medzi génovou amplifikáciou a klonovaním génov. Navyše proces génovej amplifikácie vykazuje menej chýb, zatiaľ čo proces klonovania génov vykazuje viac chýb.

Nasledujúci infographic sumarizuje rozdiel medzi génovou amplifikáciou a klonovaním génov.

Zhrnutie - zosilnenie génov vs klonovanie génov

Génová amplifikácia je proces vytvárania kópií požadovaného génu pomocou polymerázovej reťazovej reakcie v podmienkach in vitro, zatiaľ čo klonovanie génov je proces vytvárania kópií požadovaného génu pomocou rekombinantnej molekuly DNA a živej organizmy / hostiteľskej baktérie. Toto je základný rozdiel medzi amplifikáciou génu a klonovaním génu.

referencie:

1. „Molekulárne klonovanie“. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 2. augusta 2019, k dispozícii tu.
2. „Zosilnenie génu“. Zosilnenie génov - prehľad Témy ScienceDirect, dostupné tu.

S láskavým dovolením:

1. „PCR“ od Madprime - vlastná práca (CC BY-SA 3.0) prostredníctvom Commons Wikimedia
2. „Kroky molekulárneho klonovania“ autor Alexpicardal97 - vlastná práca (CC BY-SA 4.0) cez Commons Wikimedia