Sekvenovanie DNA je dôležitou technikou v molekulárnej genetike, kde sa určuje nukleotidová sekvencia konkrétnej sekvencie DNA alebo celý genóm organizmu. To umožňuje vedcovi alebo diagnostikovi určiť mutácie sekvencií DNA a rozlíšiť jeden organizmus od druhého na základe ich genetického zloženia.. Génové sekvenovanie je postupnosť sekvenovania génu alebo fragmentu DNA pomocou Sangerovho sekvenovania alebo nasledujúcej generácie. DNA fingerprinting zahŕňa techniku známu ako polymorfizmus s obmedzenou dĺžkou fragmentu (RFLP), kde sú vzorky DNA dvoch alebo viacerých subjektov fragmentované a analyzované, aby sa určila totožnosť osoby. Toto je kľúčový rozdiel medzi sekvenovaním génov a odoberaním DNA.
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je to sekvenovanie génov
3. Čo je DNA odtlačok prsta
4. Podobnosti medzi sekvenovaním génov a odtlačkami prstov DNA
5. Porovnanie bok po boku - sekvenovanie génov vs DNA fingerprinting v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie
Génové sekvenovanie sa uskutočňuje na stanovenie nukleotidovej sekvencie konkrétneho génu. Ak je celý genóm sekvenovaný, označuje sa ako sekvenovanie celého genómu. Spočiatku sa sekvenovanie génov uskutočňovalo použitím chemických metód, ktoré používali škodlivé chemikálie, ako napríklad pyridín; táto technika bola čoskoro prerušená kvôli toxickej povahe experimentu. V súčasnosti sa sekvenovanie génu väčšinou uskutočňuje pomocou metódy známej ako Sangerove sekvenovanie, ktoré využíva krok ukončenia reťazca deoxyribonukleovými kyselinami. Reakcia sa uskutočňuje v štyroch samostatných skúmavkách, kde v každej skúmavke je primér značený pomocou fluorescenčného markera, ktorý nakoniec určí sekvenciu konkrétneho fragmentu. Automatické sekvenovanie Sanger využíva detektor na detekciu fluorescenčných signálov a poskytovanie výsledkov.
Obrázok 01: Sekvenovanie DNA
Sekvenovanie nasledujúcej generácie je najnovší vývoj metód sekvenovania a je to vysoko výkonná technika, ktorá je ekvivalentná uskutočňovaniu 1 000 Sangerových sekvenčných reakcií naraz. Hlavné rysy sekvencovania nasledujúcej generácie sú;
Génové sekvenovanie sa používa hlavne na stanovenie sekvencie nového génu alebo na analýzu mutácií génu prítomného v chorých stavoch a na potvrdenie genetického základu chorôb. Uplatňuje sa aj v oblasti poľnohospodárskej biotechnológie na určovanie nových odrôd druhov rastlín a na identifikáciu rastlinných génov zodpovedných za prospešné agronomické vlastnosti, ako je odolnosť proti škodcom, odolnosť voči chorobám a odolnosť voči suchu..
DNA fingerprinting je technika, ktorá sa používa najmä v forenzných štúdiách na potvrdenie totožnosti osoby zapojenej do forenzného vyšetrovania. V počiatočných dňoch sa uskutočňovalo odoberanie DNA pomocou hybridizačnej techniky s použitím fluorescenčných alebo rádioaktívne značených markerov. V súčasnosti sa DNA fingerprinting robí pomocou techniky RFLP. Táto technika využíva reštrikčné enzýmy, čo sú enzýmy schopné sekania DNA v špecifických sekvenciách. Keď sa dve vzorky privedú na analýzu, obidve vzorky sa štiepia rovnakými reštrikčnými enzýmami, čím sa získajú fragmenty. Ak sú tieto dve vzorky podobné, mal by byť elektroforézny gél pre obe vzorky identický. Ak to nie je podobné, obrázky gélu nebudú identické. Týmto spôsobom sa teda dá potvrdiť totožnosť osoby.
DNA fingerprinting sa najčastejšie používa pri hľadaní skutočného podozrivého na mieste činu analýzou dostupných biologických vzoriek na mieste činu. DNA sa extrahuje z týchto dostupných vzoriek (srsť / sperma / pľuvadlo / krv) a analyzuje sa vzorkami DNA podozrivých, aby sa stanovil skutočný vinník..
Sekvenovanie génov vs DNA odtlačky prstov | |
Génové sekvenovanie je proces, ktorý určuje nukleotidovú sekvenciu konkrétneho génu alebo celého genómu. | Odtlačky DNA zahŕňajú techniku, pri ktorej sú vzorky DNA dvoch alebo viacerých subjektov fragmentované a analyzované s cieľom určiť totožnosť osoby. |
Základy technológie | |
Pri sekvenovaní génov sa používajú sekvenčné metódy, ako je napríklad Sangerove sekvenovanie alebo sekvenovanie nasledujúcej generácie. | Polymorfizmus s obmedzením fragmentu sa používa na analýzu dvoch vzoriek jedincov pri odbere DNA. |
aplikácia | |
Génové sekvenovanie sa používa hlavne v genetických štúdiách na analýzu nových génov, na identifikáciu mutácií a na vývoj inferencie založenej na genetickej diagnostike.. | DNA fingerprinting sa používa pri forenzných vyšetreniach na odvodenie záverov o totožnosti podozrivého. |
Génové sekvenovanie a DNA fingerprinting sa stali dvoma populárnymi testami, ktoré sa vykonávajú na charakterizáciu konkrétneho génu alebo na identifikáciu konkrétnej osoby pomocou genetického odtlačku danej osoby. Tieto techniky sú presné a rýchle a vykonávajú ich kvalifikovaní pracovníci s cieľom získať potvrdené výsledky. Rozdiel medzi sekvenovaním génov a odoberaním DNA je ten, že sekvenovanie génov sa zameriava na nájdenie presného poradia nukleotidov génu, zatiaľ čo snímanie DNA sa zameriava na potvrdenie identity jednotlivcov v forenzných štúdiách..
Môžete si stiahnuť verziu tohto článku vo formáte PDF a použiť ju na účely offline podľa citácie. Stiahnite si PDF verziu tu Rozdiel medzi sekvenovaním génov a DNA odtlačkami prstov
1. „Odtlačky DNA.“ Britannica.Com. K dispozícii tu. Prístup k 6. septembru 2017.
2. „Odtlačky DNA - GeneEd - genetika, vzdelávanie, objav.“ Americká národná lekárska knižnica, Národné ústavy zdravia, k dispozícii tu. Prístup k 6. septembru 2017.
3. „DNA sekvenovanie“. Khan Academy, k dispozícii tu. Prístup k 6. septembru 2017
1. „Rádioaktívna fluorescenčná sekvencia“ od Abizara na anglickej Wikipédii (CC BY-SA 3.0) prostredníctvom Commons Wikimedia.