V súvislosti s mikroskopiou sa zafarbenie považuje za zásadný krok pri zvyšovaní kontrastu mikroskopického obrazu, najmä na zvýraznenie rôznych štruktúr v biologických tkanivách. Pri farbení náterov periférnej krvi a kostnej drene sa používajú škvrny Wright a Giemsa. Tieto škvrny sú známe ako škvrny Romanowského. Obe tieto škvrny sú zložené z dôležitých zložiek: oxidovaná metylénová modrá, eozín Y a azúrové farbivá B. Funkciou metylénovej modrej a azúrovej B je zafarbenie jadra farbami od modrej po fialovú. Tieto škvrny sa široko používajú pri štúdiu morfológie červených krviniek a pri vykonávaní diferenciálneho počtu bielych krviniek. Diagnóza rôznych chorobných stavov, ako je leukémia, sa dá dosiahnuť pomocou postupov farbenia podľa Romanowského. Wrightov farbenie sa používa na rozlíšenie krviniek, ktoré pozostávajú zo zmesi farbív eozínu a metylénovej modrej. Farbenie Giemsou sa využíva pri farbení bakteriálnych buniek a ľudských buniek a môže sa kombinovať s farbením Wrightom, aby sa vytvorilo farbenie Giemsa Wrightovej.. Toto je kľúčový rozdiel medzi farbením Giemsa a farbením Wright.
Giemsa farbenie sa používa na cytogenetiku a histopatologickú diagnostiku parazitov malárie a iných parazitárnych chorôb. Farbenie Giemsou sa môže tiež považovať za základné farbenie pri klasifikácii lymfómov pri klasifikácii Kielu. Giemsa farbenie je potrebné pre pásy Giemsa, ktoré sa bežne nazývajú G-pásy. Prúžok Giemsa sa používa na farbenie chromozómov a tiež na vytváranie karyogramov. Chromozomálne abnormality, ako sú translokácie a prestavby, sa identifikujú pomocou pruhu Giemsa. Giemsa farbenie sa používa v histológii kvôli jeho vysokokvalitnému farbeniu jadrovej membrány a chromatínu, metachromázii niektorých bunkových zložiek a rôznym vlastnostiam cytoplazmatického farbenia na základe typu bunky..
Obrázok 01: Giemsa Stain
Roztok Giemsa obsahuje metylénovú modrú, Azure B a eozín a farbenie sa pripravuje komerčne pomocou prášku Giemsa. Stabilita zafarbenia závisí od metylénovej azúry a jej zmesi spolu s metylénovou modrou, ktorá tvorí eozinát. Giemsa farbenie je zvlášť dôležité pre fosfátové skupiny v reťazci DNA a viaže sa na oblasti, kde je prítomné vysoké množstvo väzieb adenín-tymín. Pri spôsobe farbenia Giemsou sa tenká vrstva vzorky umiestni spočiatku na mikroskopické sklíčko spolu s niekoľkými kvapkami čistého metanolu počas asi 30 sekúnd. Potom sa sklíčko ponorí do 5% roztoku farbiva Giemsa, ktorý sa pripravuje čerstvo, asi 20 - 30 minút. Nakoniec sa sklíčko premyje vodou z vodovodu a nechá sa vysušiť. Giemsa farbenie je známe ako diferenciálne farbenie, pretože Wright's-Giemsa Stain sa vytvára, keď sa Wrightovo farbenie kombinuje s Giemsa. Preto sa môže použiť pri štúdiu patogénnych baktérií naviazaných na ľudské bunky. Tu sú ľudské bunky a bakteriálne bunky zafarbené deferenciálne a fialové a ružové farby.
Wrightova škvrna je pomenovaná po Jamesovi Homerovi Wrightovi, ktorý modifikoval Romanowského škvrnu. Wrightovo farbenie sa používa na rozlíšenie typov krvných buniek, pretože pomáha rozlišovať medzi typmi krvných buniek. V dôsledku toho môžu byť infekcie diagnostikované sledovaním počtu bielych krviniek. Zafarbenie je zmesou eozínu, ktorá je červenej farby, a farbív metylénovej modrej. Wrightovo farbenie sa používa na farbenie a pozorovanie vzoriek moču, náterov z periférnej krvi a aspirátov kostnej drene pod svetelnými mikroskopmi. Wrightovo farbenie sa používa pri farbení chromozómov v cytogenetike na podporu diagnostiky niekoľkých chorôb a syndrómov. Vzorky moču, ktoré sú zafarbené Wrightovým farbením, identifikujú eozinofily, čo naznačuje infekciu močových ciest.
Obrázok 02: Wright Stain
Pri Wrightovom farbení sa pripraví krvný film sušený na vzduchu a nanesie sa Wright farbenie a nechá sa pôsobiť 3 minúty. Potom sa pridá tlmivý roztok rovnakého množstva farbiva, jemne sa premieša a nechá sa 5 minút. Sklíčko sa drží vodorovne a dobre sa premyje neutrálnou destilovanou vodou. Nakoniec sa vysuší a pozoruje sa pod mikroskopom.
Giemsa Stain vs Wright Stain | |
Giemsa farbenie je technika diferenciálneho farbenia používaná primárne na farbenie bakteriálnych buniek a tiež ľudských buniek. | Wrightov farbenie je technika diferenciálneho farbenia, ktorá sa používa predovšetkým pri postupoch farbenia krvných náterov, vzoriek moču a aspirátov kostnej drene.. |
Farbenie je základná laboratórna technika, ktorá sa používa pri mikroskopii a ktorá sa používa na zvýšenie kontrastu mikroskopického obrazu. Giemsa farbenie a Wright Stain spolu známe ako Romanowsky farbenie zahŕňajú vykonávanie diferenciálneho počtu bielych krviniek a štúdium morfológie buniek červených krviniek. Oxidovaná metylénová modrá, eozín Y a azúrové B farbivá sú dôležitými zložkami Romanowského farbenia. Farbenie Giemsou sa používa predovšetkým pri farbení bakteriálnych buniek, ale môže sa použiť aj pre ľudské bunky. Farbenie Wrightom sa bežne používa pri farbení krvných náterov, vzoriek moču a aspirátov kostnej drene. Toto je rozdiel medzi Giesmovým morením a Wrightovým morením.
Môžete si stiahnuť verziu tohto článku vo formáte PDF a použiť ju na účely offline podľa citácie. Stiahnite si PDF verziu tu Rozdiel medzi Giemsa Stain a Wright Stain
1. Barcia, J. J. „Giemsa škvrna: jej história a aplikácie.“ Medzinárodný časopis chirurgickej patológie., US National Library of Medicine, júl 2007, k dispozícii tu. Prístup k 12. septembru 2017
2. Krafts, K P a S E Pambuccian. "Romanowsky farbenie v cytopatológii: história, výhody a obmedzenia." Biotechnika a histochémia: oficiálna publikácia Komisie pre biologické farbivá., Národná knižnica lekárov USA, apríl 2011, k dispozícii tu. Prístup k 12. septembru 2017
1. „Trypanosoma-evansi-potkan-krv-Giemsa-farbenie“ autor Alan R Walker - vlastná práca (CC BY-SA 3.0) prostredníctvom Commons Wikimedia
2. „Žírna bunka, aspirát kostnej drene, Wright Stain (5916735712)“ Ed Uthman z Houstonu, TX, USA - žírna bunka, aspirát kostnej drene, Wright StainUploaded CFCF (CC BY 2.0) prostredníctvom Commons Wikimedia.