Rozdiel medzi gramovou škvrnou a kyslou rýchlo

Kľúčový rozdiel - Gram Stain vs Acid Fast

Baktérie sú veľmi malé mikroorganizmy. Sú priehľadné a ich zisťovanie je ťažké v životných a nezaistených podmienkach. Preto sú vyvinuté rôzne spôsoby farbenia na uľahčenie bakteriálnej detekcie. Existujú tri hlavné typy techník farbenia: jednoduché farbenie, diferenciálne farbenie a štrukturálne farbenie. Diferenciálne farbenie je technika, ktorá používa na rozlíšenie baktérií viac ako jedno farbenie. Gramové škvrny a kyselinovzdorné škvrny sú najobľúbenejšie známe ako diferenciálne škvrny. Gramovo farbenie je technika diferenciálneho farbenia, ktorá rozdeľuje baktérie do dvoch skupín známych ako gram-pozitívne baktérie a gram-negatívne baktérie. Kyslé rýchle farbenie je diferenciálne sfarbenie používané na identifikáciu kyslých rýchlo organizmov, ako je Mycobacterium z nekyslých rýchlych organizmov. Toto je kľúčový rozdiel medzi farbením Gram a farbením Acid Fast.

OBSAH

1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je Gram Stain
3. Čo je Acid Fast
4. Podobnosti medzi Gramovým farbivom a kyslou rýchlo
5. Porovnanie vedľa seba - Gram Stain vs Acid Fast v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie

Čo je Gram Stain?

Gramovo farbenie je dôležitou technikou diferenciálneho farbenia používanou na bakteriálnu identifikáciu v mikrobiológii. Túto techniku zaviedol dánsky bakteriológ Hans Christian Gram v roku 1884. Gramovo farbenie rozdeľuje baktérie do dvoch hlavných skupín s názvom grampozitívne a gramnegatívne, ktoré sú veľmi dôležité pri klasifikácii a identifikácii baktérií. Mikrobiológovia uskutočňujú farbenie gramov ako počiatočný krok pri charakterizácii baktérií počas štúdií.

Baktérie sú zoskupené na základe rozdielov v ich bunkovej stene. Grampozitívne baktérie sa skladajú z hrubej peptidoglykánovej vrstvy v ich bunkovej stene, zatiaľ čo gramnegatívne baktérie sa skladajú z tenkej peptidoglykánovej vrstvy v ich bunkovej stene. Výsledok farbenia gramom bude založený na rozdiele v hrúbke peptidoglykánovej vrstvy bunkovej steny.

Farbenie gramov sa uskutočňuje pomocou štyroch rôznych činidiel, menovite; primárne zafarbenie, moridlo, odfarbovacie činidlo a zafarbenie čítača. Ako primárne a protifarebné škvrny sa používajú kryštalická fialová a safranín, zatiaľ čo ako moridlo a odfarbovač sa používa gram jód a 95% alkohol. Základné kroky farbenia gramov sú nasledujúce;

Na čisté sklíčko sa pripraví bakteriálny náter, ktorý sa tepelne fixuje a chladí.
Náter je zaplavený krištáľovo fialovou na 1 - 2 minúty.
Náter sa prepláchne pomaly tečúcou vodou z vodovodu, aby sa odstránili nadbytočné škvrny.
Grams jód sa aplikuje na náter 1 minútu.
Náter sa prepláchne pomaly tečúcou vodou z vodovodu
Náter je premytý 95% alkoholom počas 2 - 5 sekúnd a prepláchnutý pomaly tečúcou vodou z vodovodu.
Rozter je počítaný sfarbeným safranínom po dobu 1 minúty
Náter sa prepláchne pomaly tečúcou vodou z vodovodu, vysuší sa a pozoruje sa pod mikroskopom.

Na konci farbenia gramom budú gramnegatívne baktérie pozorované v ružovej farbe, zatiaľ čo grampozitívne baktérie budú pozorované vo fialovej farbe.

Obrázok 01: Gram negatívne a Gram pozitívne baktérie

O výsledku farbenia grammi rozhoduje hrúbka peptidoglykánovej vrstvy v ich bunkovej stene. Počas odfarbovacieho kroku sa primárne zafarbenie a moridlo ľahko odstraňujú z gramnegatívnych baktérií a stávajú sa bezfarebnými, pretože majú tenkú peptidoglykánovú vrstvu. Primárne farbenie je zachované v grampozitívnych baktériách, pretože majú silnú peptidoglykánovú vrstvu. Čítačové farbenie nebude účinné pre grampozitívne baktérie kvôli zachovaniu primárneho farbenia. Teda grampozitívne baktérie budú viditeľné v primárnej farbe zafarbenia, tj fialovej farby. Farbenie čítača zafarbí gramnegatívne baktérie a bude viditeľné vo výberovej farbe, čo je farba safranínu. Preto je ľahké rozdeliť baktérie do dvoch skupín podľa gramového farbenia a je to cenné pri bakteriálnej diferenciácii a identifikácii.

Čo je Acid Fast?

Stálosť kyselín je fyzikálna vlastnosť určitých baktérií, najmä ich odolnosť voči odfarbovaniu kyselinami počas farbenia. Po zafarbení tieto organizmy odolávajú odfarbovacím postupom založeným na zriedenej kyseline alebo etanole, ktoré sú bežné v mnohých farbiacich protokoloch. Týmto organizmom sa teda udeľuje názov „acid fast“. Táto vlastnosť sa prejavuje vďaka vysokej hladine voskového materiálu (kyseliny mykolovej) v ich bunkových stenách. Tento test je kritický pre identifikáciu Mycobacterium tuberculosis.

Obrázok 2: Kyslé rýchle mykobaktérie

Toto kyslé rýchle farbenie bolo vyvinuté Paulom Ehrlichom v roku 1882. Ehrlichova kyselinová rýchla technika bola modifikovaná Ziehl-Neelsenom a teraz sa používa častejšie. Postup rýchleho farbenia kyselinou zahrnuje tri rôzne reagenty. Karbol fuschin sa používa ako primárne farbivo. Ako odfarbovacie činidlo sa používa kyslý alkohol. Ako čítačové farbenie sa používa metylénová modrá. Postup farbenia sa uskutočňuje nasledujúcim spôsobom.

Primárne farbenie (karbol fuchsín) sa aplikuje na fixnú vzorku na podložné sklíčko (všetky bunky sa zafarbia červenou farbou).
Sklíčko sa zahrieva parou počas 5 minút, čím sa škvrny vnesú do buniek správne.
Potom sa pridá odfarbovací roztok (Týmto sa odstráni červené farbivo zo všetkých buniek s výnimkou kyslých rýchlych baktérií)..
Ako kontrastné farbivo sa pridáva metylénová modrá (zafarbí všetky odfarbené bakteriálne bunky).
Kyslé rýchle baktérie zostávajú červené, zatiaľ čo kyslé rýchle baktérie sa zafarbia modrou farbou.

Aké sú podobnosti medzi Gramovým farbivom a kyslým rýchlym?

Gramovo farbenie a kyselina rýchlo sú dve techniky diferenčného farbenia.
Obe techniky rozdeľujú baktérie do dvoch skupín.
Obe techniky používajú dve škvrny a jedno odfarbenie.

Aký je rozdiel medzi Gramovým farbivom a kyselinou rýchlo??

Gram Stain vs Acid Fast
Gramovo zafarbenie je technika diferenciálneho zafarbenia, ktorá rozdeľuje baktérie na dve skupiny Gram-pozitívne baktérie a Gram-negatívne baktérie..	Acid Fast farbenie je diferenciálne farbenie používané na identifikáciu kyslých rýchlych organizmov od nekyslých rýchlych organizmov.
Primárne farbivo
Kryštálová violeť je bežne používané primárne farbenie v gramovom farbení.	Karbol fuchsín je primárne farbivo používané v kyslom prostredí rýchlo.
Odfarbovacie činidlo
95% alkohol sa používa ako odfarbovacie činidlo v gramovom farbení.	Kyslý alkohol sa používa ako odfarbovacie činidlo pri kyslých liekoch.
Počítadlo Stain
Gramovo farbenie používa safranín ako čítačové farbenie.	Kyslé rýchle farbenie používa ako protiprúdové farbenie metylénovú modrú farbu.
pozorovanie
Gramnegatívne baktérie sú pozorované vo výberovej farbe a grampozitívne baktérie sú pozorované vo fialovej farbe.	Kyslé rýchle baktérie sú pozorované v červenej farbe a nekyslé rýchle baktérie v modrej farbe.

Zhrnutie - Gram Stain vs Acid Fast

Vizualizácia mikroorganizmov v živom stave je náročná. Preto sa biologické farbenie a postupy farbenia značne používajú na štúdium ich vlastností. Diferenčné farbenie je jeden typ farbiacej techniky používanej na diferenciáciu baktérií. Gramovo farbenie a kyslé rýchle farbenie sú dve techniky diferenčného farbenia. Gramovo farbenie rozlišuje gramnegatívne baktérie a grampozitívne baktérie na základe hrúbky ich bunkových stien. Kyslé rýchle farbenie odlišuje kyslé rýchle baktérie od nekyslých rýchlych baktérií na základe obsahu kyseliny mykolovej v bunkovej stene. Toto je rozdiel medzi kyslým rýchlym a gramovým farbením.

Stiahnite si PDF verziu programu Gram Stain vs Acid Fast

Môžete si stiahnuť verziu tohto článku vo formáte PDF a použiť ju na účely offline podľa citácie. Stiahnite si PDF verziu tu Rozdiel medzi Gramovým farbivom a kyselinou rýchlo.

Referencie:

1. Aryal, Sagar. „Kyslý-rýchly farbivový princíp, postup, interpretácia a príklady.“ Mikrobiologické poznámky online. N.p., 8. mája 2017. Web. K dispozícii tu. 20. júla 2017.
2. Diferenciálne škvrny na identifikáciu baktérií: Gram, Acid-fast & Endospore. N.p., n.d. Web. K dispozícii tu. 20. júla 2017.

S láskavým dovolením:

1. „Lymfatická uzlina - atypická mykobakteriálna infekcia (MAI) - AFB farbenie“ od Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) prostredníctvom Flickr
2. „Gramovo farbenie 01“ od Y tambe - súbor Y tambe (CC BY-SA 3.0) prostredníctvom Commons Wikimedia

Veda a príroda