Rozdiel medzi HPLC a rýchlou HPLC

kľúčový rozdiel medzi HPLC a rýchlou HPLC je to tlak pumpy, ktorý používame pre HPLC, je približne 40 MPa, zatiaľ čo tlak pumpy pre rýchlu HPLC je približne 3 - 5 MPa.

Najbežnejšou technikou, ktorú používame na oddelenie zložiek zmesi, je „kvapalinová chromatografia“. Na dosiahnutie tohto cieľa existuje niekoľko techník, z ktorých je HPLC veľmi populárna. HPLC znamená vysokovýkonná kvapalinová chromatografia, ktorá rýchlo a efektívne identifikuje, kvantifikuje a separuje zložky kvapalnej zmesi. Rýchla HPLC je špeciálna aplikácia HPLC, ktorá neskoro upútala pozornosť tých, ktorí sa zaoberajú štúdiom roztokov.

OBSAH

1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je HPLC
3. Čo je rýchla HPLC
4. Porovnanie bok po boku - HPLC vs rýchla HPLC v tabuľkovej forme
5. Zhrnutie

Čo je to HPLC?

HPLC je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia. Využíva vysoký tlak na tlačenie rozpúšťadiel tak, aby prešli cez kolónu. Je to tiež ideálny spôsob, ako separovať a študovať rôzne zlúčeniny, ako sú aminokyseliny, nukleové kyseliny, uhľohydráty, steroidy, antibiotiká a uhľovodíky. HPLC má mnoho výhod oproti iným metódam separácie zmesí, ako je vyššie rozlíšenie a rýchlejšia analýza. Odstraňuje potrebu opätovného zabalenia a regenerácie a ponúka lepšiu kontrolu nad parametrami, a tým zvyšuje účinnosť separácie. V ideálnom prípade sa HPLC hodí pre aplikácie vo veľkom meradle, pretože môže oddeľovať veľmi malé častice a umožňuje použitie vysokých tlakov, ktoré uľahčujú ľahké prúdenie rozpúšťadiel..

Obrázok 01: HPLC kolóna

Stručne povedané, spôsob fungovania techniky HPLC je nasledujúci. Najprv by sme mali vzorku priviesť do prúdu mobilnej fázy v malom množstve pomocou pumpy. Tlak čerpadla by sa mal udržiavať na hodnote 40 MPa. Tento prúd mobilnej fázy prechádza kolónou HPLC. Potom komponenty vo vzorke tiež prechádzajú cez kolónu. Ich rýchlosť pohybu sa však navzájom líši v dôsledku rozdielu v interakciách medzi komponentmi vzorky a adsorbentom vo vnútri kolóny. Tento adsorbent nazývame stacionárnou fázou, pretože sa nachádza vo vnútri kolóny (nepohybuje sa). Potom na konci stĺpca môžeme zozbierať vzorku, ktorá sa eluuje zo stĺpca, čím môžeme zhromaždiť komponenty vo vzorke osobitne..

Čo je rýchla HPLC?

Vedci z výskumného ústavu Schering Plough nedávno vyvinuli techniku ​​rýchlej HPLC, ktorá je pokročilou verziou HPLC, pretože umožňuje ešte rýchlejšiu separáciu zlúčenín zo zmesi. Táto technika, známa tiež ako rýchla HPLC, využíva aj častice jadra oxidu kremičitého s taveným 2,7%, ktoré sa vyrábajú fúzovaním 0,5% porézneho oxidu kremičitého na pevnú časticu oxidu kremičitého. Vďaka týmto jedinečne vyrobeným časticiam je postup separácie veľmi rýchly a to príliš nízke pri spätnom tlaku, ako je to, čo používame pri HPLC.

Obrázok 02: Prístroje FPLC

Rýchla HPLC dosahuje výsledky porovnateľné s UPLC, vedci sa však domnievajú, že táto technika je vynikajúca, pretože nevyžaduje veľmi drahé vysokotlakové zariadenie. Skvelé je, že rýchla HPLC nevyžaduje žiadne nové laboratórne protokoly.

Aký je rozdiel medzi HPLC a rýchlou HPLC?

HPLC je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia a rýchla HPLC je pokročilá forma vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie. Kľúčový rozdiel medzi HPLC a rýchlou HPLC je, že tlak pumpy, ktorý používame pre HPLC, je okolo 40 MPa. Zatiaľ čo tlak čerpadla pre rýchlu HPLC je okolo 3 - 5 MPa. Ďalej môžeme pomocou techniky HPLC separovať rôzne zlúčeniny, ako sú aminokyseliny, nukleové kyseliny, uhľohydráty, steroidy, antibiotiká a uhľovodíky, zatiaľ čo technika rýchlej HPLC sa používa hlavne na separáciu proteínov.

Nižšie uvedený infographic obsahuje viac informácií o rozdiele medzi HPLC a rýchlou HPLC.

Zhrnutie - HPLC vs rýchla HPLC

HPLC je technika kvapalinovej chromatografie, ktorá sa stala veľmi populárnou na celom svete. Fast HPLC je nová verzia HPLC, vedci z inštitútu Schering Plough vyvinuli túto novú techniku. Kľúčový rozdiel medzi HPLC a rýchlou HPLC spočíva v tlaku pumpy, ktorý používame na separáciu. To znamená; tlak pumpy, ktorý používame pre HPLC, je okolo 40 MPa. Tlak pumpy pre rýchlu HPLC je však okolo 3 - 5 MPa.

referencie:

1. „Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia“. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20. októbra 2018. K dispozícii tu 
"Potrebujete efektný systém na spustenie rýchlej HPLC - alebo áno?" Rýchla HPLC - CHROMakadémia. K dispozícii tu  

S láskavým dovolením:

1. "HPLC kolom" Dvere Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Public Domain) prostredníctvom Commons Wikimedia  
2. ”Lab's FPLC” Stephen Helms z Dallas, TX, USA - FPLC našej laboratória (CC BY-SA 2.0) cez Commons Wikimedia