kľúčový rozdiel medzi inzerčnými a substitučnými vektormi je to, že inzerčný vektor má schopnosť vložiť stredne dlhé cudzorodé DNA, zatiaľ čo náhradný vektor je schopný pojať väčšie dĺžky cudzej DNA..
Fágové vektory sú bakteriofágy používané na klonovanie. Existujú dva typy fágových vektorov; sú inzerčným vektorom a náhradným vektorom. Všetky fágové vektory tiež pozostávajú z nepodstatných génov. Tieto gény sa však musia odstrániť z fágov, aby sa uľahčili nové inzerty cudzej DNA.
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo sú vkladacie vektory
3. Čo sú náhradné vektory
4. Podobnosti medzi vkladacími a náhradnými vektormi
5. Porovnanie vedľa seba - Vkladanie vs Náhradné vektory v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie
V prvom rade je inzerčný vektor najjednoduchšou formou klonovacích vektorov lambda. V skutočnosti je to typ fágového vektora, ktorý má jedinečné reštrikčné miesto zavedené do vektorového genómu v pozícii voliteľnej DNA. Fágová DNA ďalej zostáva bez odstránenia. Toto neodstránenie fágovej DNA obmedzuje veľkosť inzertov (cudzej DNA), ktoré sa majú klonovať vo vektore. Tieto vektory sú navyše užitočné pri klonovaní a expresii cDNA. GT10, GT11 a Zap sú príklady tohto vektora.
Obrázok 01: Lambda fág
Vkladací vektor pozostáva z jedného rozpoznávacieho miesta. Primárnou funkciou tohto vektora je vývoj cDNA knižníc odvodených z eukaryotických mRNA sekvencií. Okrem toho môže pojať iba dĺžky cudzej DNA v rozsahu medzi 05-11 kb. Tiež má jedinečné miesto štiepenia na inzerciu cudzej DNA.
Nahradný vektor alebo substitučný vektor je typ fágového vektora, ktorý sa vyvinul odstránením strednej časti fragmentu fágovej DNA z oblasti „výplne“. Požadovaný inzert cudzej DNA nahrádza fágovú DNA.
Obrázok 02: Náhradný vektor
Náhradné vektory sú dôležité pri vytváraní genomických knižníc, ako sú EMBL4 a Charon40. Tieto vektory môžu pojať väčšiu dĺžku cudzej DNA v rozsahu medzi 08-24 kb. Výplňová oblasť tiež pozostáva z génu, ktorý robí fágový vektor neživotaschopným vnútri bakteriálneho hostiteľa.
Vloženie vs náhradné vektory | |
Vkladací vektor je typ fágového vektora, ktorý má reštrikčné miesto zavedené do fágového genómu v mieste voliteľnej DNA.. | Náhradný vektor je typ fágového vektora, ktorý sa vyvinul odstránením strednej oblasti výplne fragmentu fágovej DNA |
Veľkosť vložených fragmentov | |
Dĺžka 05 až 11 kb | Dĺžka 08 až 24 kb |
Výplňový fragment | |
Žiadny fragment výplne | Výplňový fragment sa nahradí cudzou vložkou |
funkcie | |
Dôležité je vytvoriť knižnice cDNA | Dôležité pri vytváraní knižníc genómu |
Príklady | |
GT10, GT11 a Zap sú príklady | EMBL4 a Charon40 sú príklady |
Štiepne miesto | |
Je prítomné jedinečné miesto štiepenia | Miesto štiepenia obsahuje gény, ktoré nie sú nevyhnutné pre lytický cyklus |
Vkladací aj náhradný vektor sú dva typy fágových vektorov. Oba vektory majú reštrikčné miesta, ktoré uľahčujú umiestnenie nových inzertov cudzej DNA. Vkladacie vektory sú dôležité pri vytváraní knižníc cDNA, zatiaľ čo náhradné vektory sú dôležité pri vytváraní genomických knižníc. Inštalačné vektory okrem toho prijímajú inzerty DNA so strednou dĺžkou. Ale náhradné vektory môžu pojať väčšie dĺžky inzertov cudzej DNA. Celkovo je to kľúčový rozdiel medzi inzerčnými a náhradnými vektormi.
1. Hasty, P, a kol. „Účinnosť inzercie verzus nahradenie vektorového zacielenia sa líši v rôznych chromozomálnych lokusoch.“ Molecular and Cellular Biology, U.S. National Library of Medicine, december 1994, k dispozícii tu.
2. „Vkladacie vektory Lambda.“ Biology 335 Notes Lecture Notes - Lambda Vectors, k dispozícii tu.
3. „Náhradný vektor“. Náhradný vektor - Terminológia molekulárnej biológie pre náhradný vektor - GenScript, k dispozícii tu.
1. „Lambda fág“ od Lizanne Koch - vlastná práca s ChemBioDraw (public domain) cez Commons Wikimedia