Oblasť výskumu sa výrazne zvrátila zavedením kultivácie buniek a využívaním bunkových línií na výskum. Na umelo pripravených bunkách a bunkových líniách sa uskutočňujú rôzne testy, aby sa vyhodnotilo správanie bunky. Väčšina výskumov na človeku vyžaduje na kultiváciu výsledkov kultiváciu buniek a bunkové línie, najmä ak sú výskumné štúdie založené na farmakológii a výskume liekov. Primárna bunková kultúra je kultúra pripravená priamou izoláciou buniek mechanickými alebo enzymatickými metódami. Bunková línia sa pripravuje kontinuálnym pasážovaním primárnej bunkovej kultúry, aby sa získala bunková línia, ktorá získala homológne znaky. kľúčový rozdiel medzi primárnou bunkovou kultúrou a bunkovou líniou je počet pasážnych časov, ktoré každá z nich má. Primárna bunková kultúra je priamo izolovaná, zatiaľ čo bunková línia je pripravená pasážovaním primárnej bunkovej kultúry niekoľkokrát.
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je to primárna bunková kultúra
3. Čo je to bunková línia
4. Podobnosti medzi primárnou bunkovou kultúrou a bunkovou líniou
5. Porovnanie vedľa seba - primárna bunková kultúra verzus bunková línia v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie
Primárna bunková kultúra je prípravok bunkovej kultúry izolovaním buniek priamo zo zdroja mechanickými alebo enzymatickými metódami. Bunky sa izolujú metódami trypsinizácie alebo netypsinizácie. Primárne bunkové kultúry sa pestujú vo vhodnom rastovom médiu, ktoré obsahuje rastové faktory, hormóny, lipidy a ďalšie nedefinované zložky. Určité médiá musia byť doplnené sérom. Médiá zaisťujú, že podmienky pre rast sú optimalizované a bunky prežívajú v optimálnych podmienkach. Bunky môžu byť izolované z rôznych zdrojov tkanív, ako je napríklad pečeňové tkanivo, endotel a nervové tkanivo u ľudí alebo vyšších zvierat pomocou trypsinizácie..
Pri izolácii buniek z rastlín a mikroorganizmov sa používajú špeciálne postupy extrakcie, ktoré využívajú mechanické aj chemické metódy. Tieto izolované bunky sa môžu imobilizovať na pevnom nosiči alebo sa môžu pasážovať po niekoľko generácií, aby sa vyvinuli do bunkovej línie.
Primárne bunkové kultúry sú prevažne dvoch typov; Adherentné bunkové kultúry a suspenzné bunkové kultúry. Adherentné primárne bunkové kultúry sú závislé od ukotvenia a vyžadujú si pevnú podporu rastu. Adherentné primárne bunkové kultúry pochádzajú hlavne z tkanív alebo orgánov. Kultúry primárnych buniek suspenzie sú nezávislé od ukotvenia a rastú v tekutom médiu. Kultúry suspenzie by sa mali počas rastovej fázy nepretržite miešať. Suspenzia primárnych bunkových kultúr môže byť priamo odvodená z krvi.
Primárne bunkové kultúry majú relatívne kratšiu životnosť, ale informácie získané z primárnych bunkových kultúr pod in vitro podmienky sú základom mnohých štúdií. Sú užitočné na štúdium bunkových charakteristík, morfologického aj chemického správania.
Bunkové línie sa široko používajú vo výskume a v súčasnosti sú na výskumné účely komerčne dostupné bunkové línie, ako sú rakovinové bunkové línie, pečeňové bunkové línie a obličkové bunkové línie. Bunkové línie sa pripravia kontinuálnym pasážovaním primárnych bunkových kultúr. Pasážovanie sa vzťahuje na subkultivačný proces, pri ktorom sa bunkové kultúry vyvíjajú do bunkovej línie. Tieto bunkové línie sú kultúry v dvojrozmerných alebo trojrozmerných matriciach a udržiavajú sa ako bunkové línie.
Bunkové línie sú klasifikované ako konečné a súvislé bunkové línie. Konečné bunkové línie sú podrobené určitému počtu pasáží (20 - 30 pasáží). Po dokončení požadovaného počtu pasáží bunková línia vstúpi do štádia starnutia. S týmito bunkami sa ľahko manipuluje, pretože ich rast je definitívny. súvislé bunkové línie sa tiež označujú ako imortalizované bunkové línie. Tieto bunkové línie nemajú určitý počet pasáží. Rastú donekonečna, a tak sú schopné získať mutácie. Kontinuálne bunkové línie sa preto ľahko zmutujú, a tak sa na rozdiel od konečných bunkových línií menia svoje morfologické a genetické vlastnosti..
Obrázok 01: Bunková línia
Bunkové línie sa používajú, pretože je to pohodlnejšie ako použitie primárnej bunkovej kultúry, pretože sa môže opakovane používať po určitú dobu. Je však viac náchylný na mutácie a kontaminácie, pretože sa zvyšuje ich množenie.
Primárna bunková kultúra verzus bunková línia | |
Primárna bunková kultúra je kultúra pripravená priamou izoláciou buniek mechanickými alebo enzymatickými metódami. | Bunková línia sa pripravuje kontinuálnym pasážovaním primárnej bunkovej kultúry, aby sa získala bunková línia, ktorá získala homológne znaky. |
Počet prechodov | |
Primárne bunkové kultúry nie sú pasážované, bunky sú udržiavané v kultivačných podmienkach. | Bunky sa pasážujú definitívne alebo neurčito pri vytváraní bunkových línií. |
druhy | |
Adherentná primárna bunková kultúra a suspenzná primárna bunková kultúra sú dva typy primárnych bunkových kultúr. | Konečná bunková línia a súvislá bunková línia sú dva typy bunkových línií. |
Dĺžka života | |
Kultúry primárnych buniek majú krátku životnosť. | Bunkové línie majú dlhšiu životnosť. |
Primárne bunkové kultúry a bunkové línie sa široko používajú vo výskume na štúdium vzorcov správania rôznych buniek za rôznych podmienok a za rôznych farmakologických aspektov. Primárne bunkové kultúry sú priamo izolované zo zdrojového orgánu alebo tkaniva a pestované na kultivačnom médiu. Podmienky sú optimalizované pre rast špecifických buniek. Naopak, bunkové línie sa pripravujú pasážovaním primárnych bunkových kultúr konečne alebo nekonečne. Bunkové línie sú komerčne dostupné a sú medzi výskumníkmi populárne vďaka ľahkému použitiu.
1.Lonza, Primárne bunky vs. bunkové línie. K dispozícii tu
1. Ľudské kolónie ľudských buniek sa klonujú in vitro pomocou klonovacích kruhov „Paphrag (CC BY-SA 2.5) cez Commons Wikimedia