Väčšina výskumných štúdií zahŕňa kultiváciu živočíšnych buniek, a preto si tieto štúdie vyžadujú udržiavanie živočíšnych bunkových línií za osobitných podmienok rastu. Kultivácia živočíšnych buniek sa vo farmakologických štúdiách vykonáva široko, aby sa identifikoval metabolizmus liečiv, diagnostika chorôb a výskum rakoviny. Médium bunkovej kultúry je dôležitým aspektom živočíšnej bunkovej kultúry. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) a Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) sú dve kultivačné médiá používané pri kultivácii živočíšnych buniek. RPMI je médium používané na kultiváciu buniek cicavcov v suspenznej kultúre. DMEM je modifikovaný typ bazálneho média so zvýšenou koncentráciou aminokyselín a vitamínov až štvornásobne. DMEM sa používa na kultiváciu buniek v adherentných kultúrach. Kľúčový rozdiel medzi týmito dvoma médiami je typ kultúry médií. RPMI sa používa na suspenzné kultúry, zatiaľ čo DMEM sa používa na kultiváciu adherentných buniek.
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je RPMI
3. Čo je DMEM
4. Podobnosti medzi RPMI a DMEM
5. Porovnanie bok po boku - RPMI vs DMEM v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie
RPMI alebo Roswell Park Memorial Institute Medium sa tiež označujú ako RPMI 1640. Názov médií bol odvodený inštitútom, v ktorom boli médiá objavené. Toto médium sa bežne používa v živočíšnych bunkových kultúrach, najmä na rast cicavčích buniek. Pôvodne boli vyvinuté na rast ľudských lymfocytov.
Nasledujúce zložky sú zahrnuté v RPMI.
Zvláštnosťou RPMI je zvýšená koncentrácia fosfátov v médiu. RPMI sa používa v atmosfére 5% oxidu uhličitého. To poskytne maximálne a optimálne podmienky pre rast buniek. PH média sa pomocou pufrovacieho systému hydrogenuhličitanu udržuje na 8,0.
Obrázok 01: Bunková kultúra na Petriho miske
Dulbeccovo modifikované Eaglovo médium (DMEM) je modifikované médium, ktoré je komerčne pripravené. Pôvodná textúra stredného prášku je žltá. V DMEM je koncentrácia vitamínu zvýšená až štvornásobne, čím sa zvyšuje obsah živín v médiu.
DMEM sa tiež modifikuje pridaním ďalších solí, ako je dusičnan železitý, pyruvát sodný a niektoré neesenciálne aminokyseliny, ako sú serín a glycín. Formulácia glukózy v médiu sa tiež zmení. Pôvodná formulácia pozostáva z 1 000 mg / l glukózy, zatiaľ čo v DMEM je koncentrácia zvýšená až na 4500 mg / l. DMEM tiež vyžaduje doplnenie sérových médií, pretože to nie je úplné médium. DMEM sa najčastejšie dopĺňa fetálnym hovädzím sérom (FBS). FBS poskytuje požadované proteíny a rastové faktory pre kultivačný proces.
PH média sa mení po pridaní hydrogenuhličitanu sodného. pH média pred pridaním hydrogenuhličitanu sodného je okolo 6,80 - 7,40, zatiaľ čo pH po pridaní hydrogenuhličitanu sodného leží v rozmedzí 7,60 - 8,20. Skladovacia teplota média je 2 - 8 0C.
Obrázok 02: DMEM
RPMI vs DMEM | |
RPMI je médium používané na kultiváciu buniek cicavcov v suspenznej kultúre. | DMEM je modifikovaný typ bazálneho média so zvýšenou koncentráciou aminokyselín a vitamínov. |
Prítomnosť ďalších fosfátov | |
Prítomný v RPMI. | Chýba v DMEM. |
použitie | |
| Používa sa na kultiváciu buniek v adherentných kultúrach. Je zvyknutý,
|
Druhy kultúry | |
RPMI sa používa pre suspenzné kultúry. | DMEM sa používa pre kultúry s prilepenými bunkami. |
Ako RPMI, tak DMEM sa široko používajú pri kultivácii živočíšnych buniek, najmä na kultiváciu živočíšnych bunkových línií vrátane lymfocytov in vitro. DMEM je modifikované základné médium, kde je zvýšená koncentrácia živín. RPMI vyvinutý Roswell Park Memorial Institute a je tiež médiom používaným pri kultivácii živočíšnych buniek, najmä pre lymfocyty cicavcov. Obe médiá sú komerčne dostupné. Toto je rozdiel medzi RPMI a DMEM.
1. „RPMI Media - RPMI-1640 Media.“ Sigma-Aldrich. K dispozícii tu
2. „Dulbeccovo modifikované Eaglovo médium - DME, DMEM.“ Sigma-Aldrich. K dispozícii tu
1.'Cell Culture in a small Petri dis'By kaibara87 - pôvodne odoslaný do Flickru ako bunková kultúra (CC BY 2.0) prostredníctvom Commons Wikimedia
2.'DMEM bunkové kultivačné médium'By Lilly_M - vlastná práca (CC BY-SA 3.0) cez Commons Wikimedia