kľúčový rozdiel medzi celkovým počtom buniek a počtom životaschopných buniek je to celkový počet buniek odhaduje všetky bunky vrátane živých aj mŕtvych mikrobiálnych buniek vo vzorke, zatiaľ čo počet životaschopných buniek odhaduje iba živé mikrobiálne bunky vo vzorke.
Počítanie počtu organizmov v populácii sa považuje za nevyhnutné pre väčšinu experimentálnych prác. Preto sa snažíme analyzovať počet mikróbov vo vzorke pomocou priamych a nepriamych metód. Priame merania zahŕňajú metódy, ktoré počítajú priamo počet buniek. Nepriame merania zahŕňajú meranie niektorých parametrov, ktoré môžu súvisieť s počtom buniek, ako je hustota buniek, suchá hmotnosť atď. Niektoré metódy kvantifikujú iba živé mikrobiálne bunky vo vzorke. Životaschopný počet buniek je jednou z takýchto metód. Priamy mikroskopický počet kvantifikuje všetky bunky v známom objeme média / vzorky pomocou mikroskopu. Preto počíta živé aj mŕtve bunky. Je to typ celkového počtu buniek.
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je celkový počet buniek?
3. Čo je počet životaschopných buniek
4. Podobnosti medzi celkovým počtom buniek a počtom životaschopných buniek
5. Porovnanie vedľa seba - celkový počet buniek vs počet životaschopných buniek v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie
Celkový počet buniek je metóda, ktorá zahŕňa počítanie všetkých buniek v známom objeme média / vzorky pomocou mikroskopu a počítacej komory (hemocytometer). Na rozdiel od životaschopných počtov sa počítajú živé aj mŕtve bunky. Preto je to celkový počet, pokiaľ sa počas pozorovania neaplikuje životaschopnosť. Pri mikroskopii sa bunky pozorujú priamo pod mikroskopom a spočítajú sa. Využíva bunkovú suspenziu, ktorá pozostáva z mikrobiálnych buniek. Na uľahčenie počítania a presné merania je možné vzorku zriediť. Vo veľmi vysokých / nízkych koncentráciách buniek je získanie celkového počtu buniek pomocou mikroskopu náročnou úlohou.
Obrázok 01: Počítacia komora - hemocytometer
Počítavacie komory sú ľahké, lacné a rýchle pri celkovom počte buniek. Najdôležitejšie je, že počítacie komory sú užitočné na počítanie eukaryot a prokaryot. Počítame bunky vo vybraných štvorcoch známeho objemu, aby sme kvantifikovali celkový počet buniek.
Počet životaschopných buniek je metóda počítania živých mikrobiálnych buniek vo vzorke. Počíta iba živé bunky vo vzorke. Počet životaschopných doštičiek, membránová filtrácia a najpravdepodobnejší počet sú málo techník životaschopných buniek. Tieto prístupy sú založené na raste. Metóda počítania životaschopných platní je výkonná metóda používaná v mnohých mikrobiologických oblastiach, vrátane mikrobiológie potravín a mlieka, lekárskej mikrobiológie, mikrobiológie životného prostredia, mikrobiálnej genetiky, rozvoja rastových médií a biotechnológie..
Najbežnejším spôsobom počítania životaschopných baktérií je použitie vzorky schopnej tvoriť kolónie na agarovom médiu. Počítanie doštičiek je možné vykonať dvoma spôsobmi: technika nanášania doštičiek a technika nalievania doštičiek. Známy objem vzorky sa môže rozprestrieť buď na povrchu agarovej platne, alebo sa vmiešať do agaru. Doštička sa potom inkubuje a vzniknuté kolónie sa spočítajú. Počet kolónií súvisí s počtom mikroorganizmov v pôvodnej vzorke. Životaschopné počty merajú iba tie bunky, ktoré sú živé a rastú.
Obrázok 02: Počet životaschopných platní
Najpravdepodobnejšie číslo (MPN) je alternatívou k metódam počítania doštičiek na odhad hustoty populácie životaschopných buniek. Počíta organizmy rastúce v tekutej kultúre, a je teda prevažne bakteriologickou technikou. Je zvlášť užitočný pre nízke koncentrácie organizmov, napr. mlieko, pitná voda.
Technika membránovej filtrácie je vhodnejšia, ak sú mikróby veľmi zriedené ako v mestskej vodovodnej sieti. Uskutočňuje sa to jednoducho tak, že sa nechá prejsť známy objem kvapaliny cez filter a inkubuje sa na živnom médiu. Počítajú sa kolónie, ktoré sa na filtri vyvíjajú, a počítajú sa baktérie na mililiter vzorky.
Celkový počet buniek uvádza všetky živé a mŕtve mikrobiálne bunky vo vzorke. Na rozdiel od toho počet životaschopných buniek uvádza iba živé bunky vo vzorke. Toto je kľúčový rozdiel medzi celkovým počtom buniek a počtom životaschopných buniek. Celkový počet buniek je nezávislý od rastu kolónií na agarových platniach, zatiaľ čo počet životaschopných buniek je technika založená na raste a závisí od rastu mikrobiálnych kolónií na agarových platniach.
Nižšie uvedená informačná grafika sumarizuje rozdiel medzi celkovým počtom buniek a počtom životaschopných buniek.
Celkový počet buniek enumeruje živé aj mŕtve mikrobiálne bunky, zatiaľ čo počet životaschopných buniek enumeruje iba živé bunky. Toto je kľúčový rozdiel medzi celkovým počtom buniek a počtom životaschopných buniek. Počet životaschopných buniek je tiež technikou založenou na raste, na rozdiel od celkového počtu buniek. Okrem toho si vyžaduje inkubáciu doštičiek až do získania viditeľných kolónií. Počet životaschopných platní, MPN a membránová filtrácia sú len niektoré techniky uskutočniteľného počtu buniek, zatiaľ čo priama mikroskopia a použitie hemocytometra sú dve techniky celkového počtu buniek..
1. „Počítanie baktérií“. Lumen, k dispozícii tu.
1. „Hemocytometer“ Autor: Todd - pôvodne uverejnený na Flickri ako 0356 (CC BY-SA 2.0) prostredníctvom Commons Wikimedia.
2. „Verdünnungsreihe mit Ausplattieren“ Leberechtc - vlastná práca (CC BY 3.0) prostredníctvom Commons Wikimedia