Rozdiel medzi transformantmi a rekombinantmi

Kľúčový rozdiel - transformanty verzus rekombinanty
 

Rekombinácia a transformácia sú dva zásadné kroky v genetickom inžinierstve, kde sú vlastnosti organizmu úmyselne modifikované manipuláciou s jeho genetickým materiálom. Rekombinácia je proces, pri ktorom sa cudzorodá DNA inkorporuje do vektorového genómu a vytvorí sa rekombinantná molekula DNA. Transformácia je ďalším krokom, v ktorom je rekombinantná molekula zavedená do hostiteľského organizmu. Hostiteľská bunka alebo organizmus uľahčujú expresiu rekombinantnej molekuly. Kľúčovým rozdielom medzi transformantmi a rekombinantmi sú transformanty sú bunky alebo organizmy, ktoré prijímajú rekombinantnú molekulu vo vnútri a uľahčujú expresiu zatiaľ čo rekombinanty sú vektory, ktoré umožňujú inzerciu cudzej DNA do jej genómu a transport do hostiteľských transformantov na expresiu.

OBSAH
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo sú transformanty
3. Čo sú to Rekombinanty
4. Porovnanie bok po boku - transformanty verzus rekombinanty
5. Zhrnutie

Čo sú transformanty?

Transformanty sú bunky alebo organizmy, v ktorých je rekombinantná DNA absorbovaná na expresiu. Baktérie sa bežne používajú ako hostiteľské organizmy v genetickom inžinierstve, pretože sa dajú ľahko pestovať, množiť a manipulovať s nimi v laboratórnych podmienkach a proces transformácie je v porovnaní s inými organizmami ľahký. Najobľúbenejšou hostiteľskou baktériou použitou v genetickom inžinierstve je baktéria E coli.

Počas procesu transformácie sú hostiteľské bunky indukované, aby absorbovali rekombinanty. Niektoré hostiteľské bunky však neprijímajú rekombinantné molekuly. Sú známe ako netransformanty a bunky, ktoré vo vnútri obsahujú molekuly rekombinantnej DNA, sú známe ako transformanty. Výber transformantov z netransformantov sa uskutočňuje pomocou selekčných markerov v molekulárnej biológii. Selektovateľné markery sa vkladajú do vektorového genómu spolu s inzertom DNA. Bežne používané selekčné markery sú gény rezistentné na antibiotiká. Markerové gény uľahčujú diferenciáciu transformantov a pokračujú v tomto procese. Po procese transformácie sa baktéria pestuje v médiu obsahujúcom antibiotikum. Na tomto médiu môžu rásť iba transformanty, pretože vo vnútri obsahujú rekombinantné látky.

Akonáhle sa rekombinantná molekula DNA transformuje vo vnútri hostiteľského organizmu, cudzorodá DNA sa môže buď integrovať do genómu hostiteľskej bunky, alebo môže zostať neintegrovaná v cytoplazme. K expresii a replikácii cudzej DNA však dochádza v hostiteľskom organizme a vedie k požadovanému výsledku procesu.

Čo sú to Rekombinanty?

Rekombinantný je organizmus alebo bunka, ktorá má rekombinovaný genóm obsahujúci cudziu DNA. Rekombinanty sú výsledkom procesu genetického inžinierstva. Sú umelo vyrobené in vitro vložením požadovaných génov a modifikáciou genómu. Bakteriálne plazmidy a bakteriofágy často pôsobia ako rekombinantné látky v genetickom inžinierstve. Má chiméru rôznych DNA. Rekombinantná molekula DNA prenáša cudziu DNA do hostiteľského organizmu a spôsobuje jej expresiu a tvorbu požadovaného produktu.

Rekombinantné molekuly sa skonštruujú pomocou reštrikčných endonukleáz a DNA ligáz. Požadovaný fragment DNA sa oddelí od pôvodného organizmu a vloží sa do vektora, čím sa získa rekombinant pre transformáciu. Orezanie požadovaného génu a otvorenie vektorového organizmu by sa malo uskutočniť pomocou toho istého reštrikčného enzýmu, aby sa vytvorili kompatibilné lepivé konce na ich spojenie. Akonáhle je cudzia DNA začlenená do vektorového genómu, je známa ako rekombinantná alebo rekombinantná molekula DNA.

Obrázok 02: Rekombinantná DNA

Aký je rozdiel medzi transformantmi a rekombinantmi?

Transformanty vs Rekombinanty
Transformanty sú bunky, ktoré majú vo vnútri rekombinantnú molekulu DNA.	Rekombinanty sú nosné molekuly, ktoré majú cudziu DNA vloženú do vlastného genómu.
Expresia cudzej DNA
Sú to hostiteľské bunky, ktoré sú schopné exprimovať rekombinantnú DNA.	Mali by byť schopní sa replikovať v hostiteľskom organizme.
výber
Ako hostiteľské bunky sa vyberú bunky, ktoré sa dajú ľahko pestovať a množiť.	Musia byť ľahko extrahovateľné a mali by obsahovať voliteľné značky.

Zhrnutie - Transformanty vs Rekombinanty

Transformanty sú bunky alebo organizmy s rekombinantnými molekulami DNA vo vnútri. Rekombinanty sú organizmy alebo bunky, ktoré prešli genetickou rekombináciou a majú vo svojich genómoch cudziu DNA. Bakteriálne bunky sa často používajú ako hostiteľské bunky na transformáciu a plazmidy a bakteriofágy sa často používajú ako vektory v technológii rekombinantnej DNA. Toto je rozdiel medzi transformantmi a rekombinantmi.

Referencie:
1. Griffiths, Anthony JF. „Vytvorenie rekombinantnej DNA.“ Úvod do genetickej analýzy. 7. vydanie. U.S. National Library of Medicine, 1. januára 1970. Web. 8. apríla 2017
2. Cooper, Geoffrey M. „Rekombinantná DNA“. Bunka: molekulárny prístup. 2. vydanie. U.S. National Library of Medicine, 1. januára 1970. Web. 8. apríla 2017

S láskavým dovolením:
1. „Rekombinantná tvorba plazmidov“ od Minestrone Soup na anglickej Wikipédii (CC BY-SA 3.0) prostredníctvom Commons Wikimedia.