Rozdiel medzi transformáciou a transfekciou

Transformácia vs transfekcia
 

Transformácia a transfekcia sú dve jednoduché techniky používané na zavedenie cudzieho génu do hostiteľskej bunky. Tieto techniky však závisia od typu hostiteľského alebo vektorového systému.

Čo je bunková transformácia?

Transformácia je technika použitá na zavedenie génov do kvasinkových a bakteriálnych buniek. Táto technika zvyčajne spôsobuje dedičné zmeny v génoch, a preto je expresia génu trvalá. Bakteriálna transformácia bola prvýkrát zavedená v roku 1928 Frederickom Griffithom. Potom začiatkom sedemdesiatych rokov bola táto technika použitá v roku 2007 E. coli. Počas procesu transformácie E. coli, bunky sa namočia do ľadovo chladného roztoku CaCl₂. Tento krok robí E.coli bunky kompetentné. Potom sa kompetentné bunky zmiešajú s plazmidovou DNA a inkubujú sa na ľade počas 20 až 30 minút. Následne sa podarí krátky tepelný šok, aby sa umožnil prenos DNA do bunky. Nakoniec sa bunky umiestnia do živného média a inkubujú sa pri teplote 37 ° C počas 60 až 90 minút, aby sa vytvorili plazmidy. Keď sa tieto kroky úspešne dokončia, transformované bunky sa môžu umiestniť na vhodné médium na propagáciu buniek. Pretože transformácia sa považuje za neúčinnú techniku, nemôže sa použiť na prípravu klonových bánk.

Čo je transfekcia buniek?

Transfekcia je spôsob zavedenia cudzieho génu, obvykle do cicavčích buniek. Existujú dva spôsoby transfekcie; menovite prechodná transfekcia a stabilná transfekcia. Pri prechodnej transfekcii je génová expresia dostupná po obmedzenú dobu; tak zmena génu spôsobuje dočasnú expresiu. Táto transfekčná metóda je jednoduchá a rýchla; preto sa môže používať rutinne. Jednou z nevýhod prechodnej transfekcie je obtiažnosť aplikácie pre systémy syntézy proteínov vo veľkom meradle.

Počas stabilnej transfekcie je cieľový gén integrovaný do genómu hostiteľskej bunky, a teda génová expresia je na rozdiel od prechodnej transfekcie trvalá.

Aký je rozdiel medzi transformáciou a transfekciou?

• Transformácia je zavedenie génu do prokaryotickej bunky (bakteriálnej a kvasinkovej), zatiaľ čo transfekcia sa zvyčajne nazýva zavedenie génu do cicavčej bunky..

• Transformácia má za následok dedičné zmeny génov, zatiaľ čo transfekcia môže viesť k dočasnej expresii alebo k trvalým zmenám génov.