Rozdiel medzi afinitnou a ionomeničovou chromatografiou

kľúčový rozdiel medzi afinitnou a iónomeničovou chromatografiou je to môžeme použiť afinitnú chromatografiu na oddelenie nabitých alebo nenabitých zložiek v zmesi, zatiaľ čo na oddelenie nabitých zložiek v zmesi môžeme použiť iónomeničovú chromatografiu.

Chromatografia je technika, ktorú môžeme použiť na oddelenie požadovaných zložiek v zmesi. Existujú rôzne typy, ako je kvapalinová chromatografia, plynová chromatografia atď. Afinitná chromatografia a iónomeničová chromatografia sú dve podkategórie kvapalinovej chromatografie. V týchto technikách existujú tiež dve fázy. Ide najmä o stacionárnu a mobilnú fázu. Účelom týchto techník je separovať komponenty v závislosti od väzby komponentov v mobilnej fáze na povrch stacionárnej fázy..

OBSAH

1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je to afinitná chromatografia
3. Čo je to ionomeničová chromatografia
4. Porovnanie bok po boku - afinitná vs iónová chromatografia v tabuľkovej forme
5. Zhrnutie

Čo je to afinitná chromatografia?

Afinitná chromatografia je biochemická technika, ktorú používame na oddelenie zložiek v zmesi v závislosti od interakcií medzi týmito zložkami.

Interakcie, ktoré v tomto prípade používame, zahŕňajú nasledujúce:

1. Interakcie antigén-protilátka
2. Interakcie enzým-substrát
3. Interakcie receptor-ligand
4. Interakcie proteín-nukleová kyselina

V tejto technike používame molekulárne vlastnosti molekúl pre túto separačnú techniku. Tu umožňujeme, aby požadovaná zlúčenina interagovala so stacionárnou fázou prostredníctvom vodíkových väzieb, iónových interakcií, disulfidových mostíkov, hydrofóbnych interakcií atď. Molekuly, ktoré neinteragujú so stacionárnou fázou, sa eluujú ako prvé. Môžeme ich teda oddeliť od zmesi. Požadovaná zlúčenina zostane pripojená k stacionárnej fáze. Preto ho môžeme oddeliť pomocou elučného rozpúšťadla a urobiť ho rovnako jeho oddelením.

Obrázok 01: Chromatografický stĺpec

Afinitná chromatografia je užitočná pri čistení a koncentrovaní látky zo zmesi pomocou tlmivého roztoku. Pomáha tiež redukovať nežiaduce látky v zmesi. Pri zvažovaní prístroja, ktorý používame na tento proces, by sme mali použiť stĺpec naplnený našou stacionárnou fázou. Potom by sme mali načítať mobilnú fázu, ktorá obsahuje biomolekuly, ktoré sa chystáme oddeliť. Potom ich nechajte naviazať na stacionárnu fázu. Potom pomocou premývacieho pufra môžeme separovať necieľové biomolekuly, ale cieľové molekuly by mali mať vysokú afinitu pre stacionárnu fázu, aby sa dosiahol úspech separačného procesu..

Čo je ionomeničová chromatografia?

Iónová chromatografia je forma kvapalinovej chromatografie, pri ktorej môžeme analyzovať iónové látky. Často ich používame na analýzu anorganických aniónov a katiónov (t. J. Chloridových a dusičnanových aniónov a draslíka, sodných katiónov). Aj keď je to menej bežné, môžeme analyzovať aj organické ióny. Ďalej môžeme túto techniku ​​použiť na čistenie proteínov, pretože proteíny sú nabité molekuly pri určitých hodnotách pH. Tu používame pevnú stacionárnu fázu, na ktorú sa môžu nabité častice naviazať. Napríklad ako pevný nosič môžeme použiť živicové polystyrén-divinylbenzénové kopolyméry.

Obrázok 02: Fázy ionomeničovej chromatografie

Aby sa to ďalej vysvetlilo, stacionárna fáza má fixované ióny, ako sú síranové anióny alebo kvartérne amínové katióny. Každý z nich by sa mal spájať s protiiónom (ión s opačným nábojom), ak si chceme zachovať neutralitu tohto systému. V tomto prípade, ak je protiiónom katión, pomenujeme systém ako katiónovýmennú živicu. Ale ak je protiiónom anión, je to systém na výmenu aniónov.

V procese výmeny iónov existuje päť hlavných fáz;

1. Počiatočné štádium
2. Adsorpcia cieľa
3. Začiatok elúcie
4. Koniec elúcie
5. regenerácia

Aký je rozdiel medzi afinitou a ionomeničovou chromatografiou?

Afinitná chromatografia je biochemická technika, ktorú používame na oddelenie zložiek v zmesi v závislosti od interakcií medzi týmito zložkami, zatiaľ čo iónová chromatografia je formou kvapalinovej chromatografie, pri ktorej môžeme analyzovať iónové látky. Hlavný rozdiel medzi afinitnou a iónomeničovou chromatografiou je preto v tom, že ionexovú chromatografiu môžeme použiť iba na separáciu iónových látok, zatiaľ čo afinitná chromatografia je schopná separovať nabité aj nenabité častice. Keď sa vezme do úvahy pracovný princíp, rozdiel medzi afinitnou a iónomeničovou chromatografiou je ten, že afinitná chromatografia prebieha v dôsledku skutočnosti, že cieľové molekuly majú vysokú afinitu pre stacionárnu fázu. Avšak pre ionomeničovú chromatografiu majú cieľové molekuly opačný náboj ako náboj stacionárneho fázového povrchu.

Nižšie uvedený infographic predstavuje rozdiel medzi afinitou a iónomeničovou chromatografiou ako porovnanie vedľa seba.

Zhrnutie - afinita verzus iónová chromatografia

V súhrne sú afinitná a iónomeničová chromatografia dvoma formami kvapalinovej chromatografie. Kľúčový rozdiel medzi afinitnou a iónomeničovou chromatografiou je v tom, že môžeme použiť afinitnú chromatografiu na oddelenie nabitých alebo nenabitých zložiek v zmesi, zatiaľ čo na oddelenie nabitých zložiek v zmesi môžeme použiť ionexovú chromatografiu..

referencie:

1. „Afinitná chromatografia“. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 5. októbra 2018. K dispozícii tu 
2. Libretexty. „Chromatografia na iónomeniči.“ Chemistry LibreTexts, Libretexts, 29. decembra 2016. K dispozícii tu  

S láskavým dovolením:

1. „Niklová živica“ Autor: Pdcook - Vlastné dielo, (CC BY-SA 3.0) prostredníctvom Commons Wikimedia 
2. „Iex“ od Daliaka (Public Domain) prostredníctvom Commons Wikimedia