kľúčový rozdiel medzi agarovou jamkou a diskovou difúznou metódou pri metóde difúznej jamky sa extraktový roztok plní do diery alebo jamky vytvorenej na agarovom médiu, zatiaľ čo pri metóde difúzie agarovej platne sa na povrch agaru umiestni filtračný papierový disk obsahujúci testovaný roztok..
Mikroorganizmy sú pôvodcami mnohých chorôb. Existujú rôzne antimikrobiálne látky, ktoré ničia mikroorganizmy a inhibujú alebo zastavujú ich rast. Na detekciu antimikrobiálnej aktivity sú k dispozícii rôzne metódy skríningu a hodnotenia. Medzi nimi sa bežne používajú metódy difúznej difúzie na agare a metódy difúzie na agarovom disku in vitro analýza, ktoré sú metódami difúzie na agare. Tieto metódy sa široko používajú, pretože nevyžadujú špecifikované vybavenie a ďalšie hodnotenie reprodukovateľnosti a štandardizácie. Obe metódy závisia od difúzie antimikrobiálneho činidla cez agarové médium.
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je metóda difúzie na agare
3. Čo je to metóda difúzneho disperzie na agare
4. Podobnosti medzi jamkou na agare a metódou difúzie disku
5. Porovnanie bok po boku - metóda Agar Well vs Disc Diffusion Method v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie
Metóda difúzie dobre agaru je jedna z najlacnejších a najjednoduchších in vitro testy antimikrobiálnej aktivity. Pri použití tejto metódy sa môžu rastlinné extrakty a mikrobiálne extrakty podrobiť skríningu na antimikrobiálnu aktivitu proti patogénnym mikrobiálnym druhom. Pri tejto metóde sa agarová platňa naočkuje patogénnym bakteriálnym druhom pomocou techniky rozprestretej platne. Toto sa uskutočňuje rozptýlením známeho objemu mikrobiálneho roztoku po povrchu agaru pomocou skleneného rozprašovača. Potom sa sterilným korkovým vrtákom asepticky vytvorí otvor alebo jamka (priemer 6 až 8 mm). Ďalej by sa jamka mala naplniť extraktovým roztokom (testovacím roztokom) a potom by sa doštičky mali inkubovať pri vhodnej teplote a za vhodných podmienok. Po inkubácii roztok antimikrobiálneho extraktu postupne difunduje cez agarové médium a inhibuje rast testovaných bakteriálnych druhov. Nakoniec je možné pozorovať inhibičnú zónu a ako priemer sa berie priemer zóny.
Podobne ako pri difúznej metóde pre agarovú difúziu, je metóda difúznej agarovej platne v laboratóriách bežne používanou metódou testovania antimikrobiálnej citlivosti. Pri tejto metóde sa na agarovom médiu uchováva filtračný papierový disk, ktorý obsahuje testovaný roztok. Pred tým by sa mala agarová platňa naočkovať testovaným mikroorganizmom. Potom sa filtračný papierový kotúč, ktorý obsahuje známu koncentráciu extraktového roztoku, umiestni na agarové médium. Doštičky sa potom inkubujú vo vhodných podmienkach.
Obrázok 02: Metóda difúznej disperzie na agare
Po inkubácii roztok extraktu difunduje cez agarové médium a inhibuje mikrobiálny rast. Po inkubácii sa zmeral a inhiboval priemer inhibičnej zóny.
Difúzna metóda na agare je test antimikrobiálnej aktivity, pri ktorom sa v agarovom médiu vytvorí diera a pridá sa k nej extraktový roztok. Medzitým je difúzna metóda na agarovom disku testom na antimikrobiálnu aktivitu, pri ktorom sa filtračný papierový disk obsahujúci známu koncentráciu extraktového roztoku umiestni na agarové médium. Toto je kľúčový rozdiel medzi agarovou jamkou a metódou difúzie disku. Preto sa extraktový roztok pridáva do agarovej jamky alebo do otvoru v agarovej difúznej jamkovej metóde, zatiaľ čo extraktový roztok sa pridáva na filtračný papierový disk v metóde difúznej agarovej misky. Preto metóda difúznej jamkovej difúzie nepoužíva filtračný papierový disk, zatiaľ čo metóda diskovej difúzie nevytvára agarové diery v agarovom médiu.
Predtým je porovnanie bok po boku rozdielu medzi agarovou jamkou a metódou difúzie disku.
Agarové a diskové difúzne metódy sú dva typy metód testovania antimikrobiálnej citlivosti. Obe metódy sú jednoduché a lacné metódy in vitro. V agare, pri difúznej metóde, sa na médiu vytvorí diera alebo jamka a potom sa do jamky pridá extraktový roztok na vyhodnotenie antimikrobiálnej aktivity. Naproti tomu pri spôsobe difúzie na agarovom disku sa extraktový roztok pridá na disk z filtračného papiera a potom sa umiestni na povrch agaru. Toto je kľúčový rozdiel medzi agarovou jamkou a metódou difúzie disku.
1. Balouiri, Mounyr, a kol. „Metódy vyhodnotenia antimikrobiálnej aktivity in vitro: prehľad.“ Journal of Pharmaceutical Analysis, Elsevier, 2. decembra 2015, k dispozícii tu.
1. „Agarová difúzna metóda 1“ od Sommer36 - vlastná práca (CC BY-SA 4.0) cez Commons Wikimedia