Rozdiel medzi CFU a MPN

Kľúčový rozdiel - CFU verzus MPN
 

Jednotka tvoriaca kolónie (CFU) a najpravdepodobnejšie číslo (MPN) sú dve metódy, ktoré sa používajú na výpočet mikroorganizmov vo vzorkách. Oba parametre sa používajú na detekciu kvality vody a fekálnych indikátorových baktérií vo vzorkách vody. Jednotka tvoriaca kolónie je miera použitá na výpočet počtu životaschopných bakteriálnych buniek alebo buniek húb v špecifickom objeme alebo hmotnosti danej vzorky. Štandardnou jednotkou pre tento parameter je CFU / ml alebo CFU / g. Najpravdepodobnejšie číslo je ďalšia jednotka používaná na meranie počtu životaschopných bakteriálnych buniek v kvapalnej vzorke. Kľúčový rozdiel medzi CFU a MPN je ten CFU sa počíta z bakteriálnych a hubových kolónií rastúcich na platni s pevným agarom zatiaľ čo MPN sa počíta z životaschopných baktérií rastúcich v kvapalnom médiu.

OBSAH

1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je CFU 
3. Čo je MPN
4. Porovnanie bok po boku - CFU verzus MPN v tabuľkovej forme
5. Zhrnutie

Čo je CFU?

Jednotka vytvárajúca kolónie (CFU) je parameter, ktorý meria počet životaschopných bakteriálnych alebo hubových buniek v danej vzorke. Metóda, ktorá počíta jednotky tvoriace kolónie, sa označuje ako počet štandardných dosiek. Životaschopné kolónie, ktoré sa objavia na agarových platniach, sú vyjadrené ako CFU na 1 ml (jednotka tvoriaca kolónie na mililiter) vzorky pre tekutiny alebo CFU na 1 g (jednotka tvoriaca kolónie na jeden gram) vzorky pre tuhé látky..

Na meranie CFU vo vzorke sa používajú dve bežné metódy. Oni sú metóda šírenia doštičiek a metóda nalievania doštičiek. Tieto dve metódy sú podporované technikou nazývanou sériové riedenie. Sériovo zriedené vzorky umožňujú získať počet agónií na povrchu agaru. Známy objem vzorky môže byť nanesený na povrch agarovej platne alebo zmiešaný s agarom a naliaty na platňu. Doštička sa potom inkubuje a vzniknuté kolónie sa spočítajú. Počet kolónií sa vzťahuje na počet mikroorganizmov v pôvodnej vzorke. Doštičky, ktoré vykazujú príliš veľa kolónií alebo príliš málo kolónií, sú vylúčené z počítania, pretože výsledky nemusia byť na týchto doštičkách štatisticky presné. Štatisticky je najlepším rozsahom 30 - 300 kolónií na agarovej platni. Z tohto dôvodu by sa mali vybrať správne platne na presné stanovenie počtu. Pre vyššie uvedenú funkciu sa uskutoční sériové riedenie.

Akonáhle spočítate počet životaschopných kolónií na doštičkách, CFU / ml sa môže vypočítať pomocou nasledujúcej rovnice.

CFU na ml pôvodnej vzorky = počet kolónií na riediacom faktore doštičky X

Riediaci faktor = (1 / Riedenie doštičky)

Napríklad, ak dostanete 149 kolónií na tanier 10^-4 riedenie, potom sa počet baktérií v 1 ml pôvodnej vzorky môže vypočítať takto:

CFU / ml = (149) x (1/10^-4)

= 149 × 10⁴ alebo 1490000

= 1,49 x 10⁶

Obrázok 01: Jednotka na formovanie kolónií

Čo je to MPN?

najpravdepodobnejšie číslo je alternatívne opatrenie k CFU / ml. MPN tiež odhaduje životaschopné bunky v kvapalnej vzorke. Počíta organizmy rastúce v tekutej kultúre a je to prevažne bakteriologická technika. Táto metóda je zvlášť užitočná pre vzorky, ktoré obsahujú nízke koncentrácie bakteriálnych buniek; napríklad mlieko, pitná voda atď. Hodnota MPN je vyjadrená pre 100 ml objemu. MPN sa spolieha na štatistickú metódu založenú na teórii pravdepodobnosti. Existujú štatistické tabuľky určené na zistenie hodnôt MPN na 100 ml vzorky. Tieto tabuľky ukazujú výsledky pri 95% hraniciach spoľahlivosti.

Hodnota MPN sa vypočíta po vykonaní postupu nazývaného metóda fermentácie s viacerými skúmavkami. Tri sady skúmaviek, ktoré obsahujú vhodné kultivačné médium, sa naočkujú tromi rôznymi objemami vzorky, napríklad 10 ml, 1 ml a 0,1 ml, a inkubujú sa pre rast. Po inkubačnej dobe sa skúmavky ohodnotia na + (pozitívny) alebo - (negatívny) na prítomnosť alebo neprítomnosť rastu. Vzor pozitívnych a negatívnych výsledkov sa potom porovnáva s tabuľkou štatistických pravdepodobností MPN, aby sa odhadol počet mikroorganizmov. Potom sa udáva hodnota MPN pre 100 ml vzorky. MPN sa široko používa na detekciu koliformných baktérií prítomných vo vzorkách vody.

Obrázok 02: Tabuľka MPN

Aký je rozdiel medzi CFU a MPN?

CFU verzus MPN
CFU je miera použitá na vyjadrenie počtu životaschopných bakteriálnych alebo hubových kolónií v danej vzorke.	MPN je alternatívnym opatrením voči CFU a meria počet životaschopných bakteriálnych buniek v kvapalnej vzorke.
jednotka
CFU / ml alebo CFU / g	MPN / 100 ml
Kalkulácia
CFU sa vypočíta spočítaním počtu kolónií pestovaných na agarových platniach.	MPN sa vypočíta porovnaním pozitívnych a negatívnych vzoriek skúmaviek so štatistickou tabuľkou MPN.
Technika sériového riedenia
Pred umiestnením vzoriek na agarové platne sa uskutoční sériové riedenie.	Sériové riedenie sa spravidla nevykonáva pri výpočte MPN
metódy
Metóda rozprestretia doštičiek a metóda nalievania doštičiek sú dva typy metód vykonávaných na získanie CFU.	Metóda vykonávaná na získanie hodnoty MPN je viacnásobná skúmavková fermentácia.

Zhrnutie - CFU vs MPN

Meranie mikrobiálneho rastu je potrebné z mnohých dôvodov. V závodoch na spracovanie potravín je potrebné zmerať úroveň a typ mikroorganizmov v potravinách. V potravinárskom priemysle a medicíne je potrebné zabezpečiť účinné uplatňovanie sterilizačných postupov. V čistiarňach odpadových vôd je potrebné rutinne brať mikrobiálny počet. Pri optimalizácii postupu v molekulárnej biológii je potrebné zmerať počet kolónií na doštičkách. Preto sú k dispozícii rôzne metódy merania počtu a rastu. CFU a MPN sú dve takéto metódy, ktoré sa bežne používajú v rôznych oblastiach. CFU je miera počtu životaschopných bakteriálnych a hubových kolónií prítomných v danej vzorke. Vypočítava sa pomocou štandardnej metódy počítania dosiek alebo životaschopných metód počítania dosiek. MPN je ďalším meradlom, ktoré vyjadruje počet bakteriálnych buniek prítomných v danom objeme kvapalnej vzorky. Vypočítava sa pomocou metódy fermentácie s viacerými skúmavkami a tabuľky MPN. Toto je rozdiel medzi CFU a MPN.

Stiahnite si PDF verziu CFU verzus MPN

Môžete si stiahnuť verziu tohto článku PDF a použiť ju na účely offline podľa citačných poznámok. Stiahnite si PDF verziu tu Rozdiel medzi CFU a MPN.

Referencie:

"Jednotka tvoriaca kolónie." Wikipedia. Nadácia Wikimedia, 28. mája 2017. Web. K dispozícii tu. 1. júna 2017.
„Mikrobiológia - 014 - najpravdepodobnejšie číslo.“ Mikrobiológia - 014 - najpravdepodobnejšie číslo Magisterský program mikrobiológie. N.p., n.d. Web. K dispozícii tu. 1. júna 2017.

S láskavým dovolením:

1. " Manuálne počítanie CFU ”Autor: Quentin Geissmann - Vlastné dielo (CC BY-SA 3.0) cez Commons Wikimedia
2. “OSC Microbio 00 EE MPNTable” Autor CNX OpenStax - (CC BY 4.0) prostredníctvom Commons Wikimedia