Rozdiel medzi konkurenčnou a nekonkurenčnou ELISA

kľúčový rozdiel medzi konkurenčnou a nekonkurenčnou ELISA je to kompetitívna ELISA používa inhibičný antigén, zatiaľ čo nekompetitívna ELISA nepoužíva inhibičný antigén pre test.

Enzýmom spojený imunosorbentový test (ELISA) je imunologický test, ktorý zisťuje rôzne ciele, ako sú protilátky, antigény, proteíny a glykoproteíny. Je to rýchly a jednoduchý spôsob vykonania. Preto sa častejšie používa na výskumné a diagnostické účely. ELISA zahŕňa použitie enzýmov a špecifickú väzbu protilátky a antigénu. Na základe toho, ako sa reakcie vyskytujú, existujú štyri typy ELISA: priama ELISA, nepriama ELISA, sendvičová ELISA a inhibičná ELISA. Priama, nepriama a sendvičová ELISA sú typy nekompetitívnej ELISA, zatiaľ čo inhibičná ELISA je typom kompletnej ELISA. Hlavným cieľom tohto článku je diskutovať o rozdieloch medzi konkurenčnou a nekonkurenčnou ELISA.

OBSAH

1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je konkurenčná ELISA
3. Čo je nekompetitívna ELISA
4. Podobnosti medzi konkurenčnou a nekonkurenčnou ELISA
5. Porovnanie bok po boku - konkurenčné verzus nekonkurenčné ELISA v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie

Čo je to konkurenčná ELISA?

Konkurenčná ELISA meria koncentráciu antigénu vo vzorke detekciou interferencie signálu. V tomto teste sa používa inhibítorový antigén. Ide teda o typ inhibičnej ELISA. Počas tohto postupu antigény prítomné vo vzorke súťažia s vybraným referenčným antigénom o naviazanie na špecifické množstvo značenej protilátky. Ďalej tento postup začína inkubáciou vzorky s nadbytkom značenej protilátky. Referenčný antigén by mal byť tiež vopred potiahnutý na testovacej doštičke s viacerými jamkami. Potom by sa vzorka mala pridať na testovaciu doštičku, ktorá obsahuje referenčný antigén. Voľné protilátky sa budú viazať na referenčný antigén v závislosti od množstva antigénu vo vzorke. Preto, ak je prítomných viac vzorkového antigénu, bude detekovaný menej referenčný antigén. Vytvára tak slabší signál.

Obrázok 01: ELISA

Naopak, ak vzorka obsahuje menšie množstvo antigénu, viac a viac referenčného antigénu obsadí protilátky a poskytne silný signál. Pretože kompetitívna ELISA dáva silnejší signál, keď vzorka obsahuje malé množstvo antigénov, kompetitívna ELISA je veľmi citlivá skúška, dokonca aj pre vzorky s malým počtom antigénov..

V niektorých konkurenčných súpravách ELISA sa namiesto značenej protilátky použije značený antigén. Tu bude značený antigén a vzorkový antigén súťažiť o naviazanie na primárnu protilátku. Podobne, keď je množstvo antigénu vo vzorke nízke, množstvo značeného antigénu, ktorý sa viaže na protilátky, bude vyššie a vytvorí silnejší signál..

Čo je nekompetitívna ELISA?

Medzi štyrmi typmi ELISA sú tri typy ELISA nekompetitívne. Sú to priame testy ELISA, nepriame testy ELISA a sendvičové testy ELISA. Všetky tri formáty pracujú podľa spoločného princípu ELISA s malými rozdielmi v metodológiách.

Priama ELISA používa enzýmom značenú primárnu protilátku. Preto nevyžaduje sekundárnu protilátku. Preto je priama ELISA rýchlejšia ako iné typy ELISA. Primárna protilátka sa bude priamo viazať na imobilizovaný cieľový antigén, ktorý je prítomný v doštičke. Preto bude prebiehať reakcia enzým-substrát, ktorá produkuje viditeľný signál.

Obrázok 02: Sendvičová ELISA

Na rozdiel od priamej ELISA, nepriama ELISA používa neznačenú primárnu protilátku a enzýmom označenú sekundárnu protilátku. Akonáhle sa primárna protilátka viaže na imobilizovaný antigén, sekundárna protilátka sa naviaže na primárnu protilátku. Enzým v sekundárnej protilátke bude reagovať s antigénom a bude produkovať viditeľný signál. Sendvičová ELISA sa líši od priamej aj nepriamej ELISA. Tu je protilátka imobilizovaná na stene testovacej platne.

Aké sú podobnosti medzi konkurenčnou a nekonkurenčnou ELISA?

Konkurenčná a nekompetitívna ELISA sú dva typy techník imunosorbentnej analýzy.
Sú to vysoko flexibilné a citlivé techniky.
Okrem toho sú kompetitívne aj nekompetitívne testy ELISA imunoanalýzy spojené s enzýmami.
Obidve metódy tiež generujú signál v dôsledku reakcie enzým-substrát.

Aký je rozdiel medzi konkurenčnou a nekonkurenčnou ELISA?

Konkurenčná ELISA je typom ELISA, ktorý sa spolieha na dokončenie medzi antigénom analytu a značeným antigénom pre obmedzené množstvo špecifickej protilátky. Na druhej strane neexistuje žiadna takáto konkurencia medzi záujmovým antigénom a referenčným antigénom v nekompetitívnej ELISA. Toto je kľúčový rozdiel medzi konkurenčnou a nekonkurenčnou ELISA. Podobne konkurenčná ELISA je inhibičnou ELISA, zatiaľ čo nekompetitívna ELISA nie je inhibičnou ELISA. To je tiež rozdiel medzi konkurenčnou a nekonkurenčnou ELISA.

Konkurenčná ELISA je navyše vhodnejšia na meranie nízkeho množstva požadovaného antigénu. Je to citlivá metóda. Na druhej strane nekompetitívna ELISA nezávisí od počtu antigénov prítomných vo vzorke. Preto je to tiež rozdiel medzi konkurenčnou a nekonkurenčnou ELISA.

Nižšie uvedený infographic vysvetľuje rozdiel medzi konkurenčnou a nekompetitívnou ELISA porovnateľne.

Zhrnutie - konkurenčné verzus nekonkurenčné ELISA

Konkurenčná a nekompetitívna ELISA sú dva hlavné typy testov ELISA alebo imunosorbentných testov spojených s enzýmami. Pri zhrnutí rozdielu medzi konkurenčnou a nekompetitívnou ELISA sa konkurenčná ELISA opiera o konkurenciu medzi záujmovým antigénom a referenčným antigénom smerom k obmedzenému množstvu protilátok. Konkurenčná ELISA sa preto tiež nazýva inhibičná ELISA. Na druhej strane sa nekonkurenčná ELISA nespolieha na konkurenciu medzi cieľovými antigénmi a referenčnými antigénmi. Používa prebytok značenej špecifickej protilátky k požadovanému analytu. Toto je kľúčový rozdiel medzi konkurenčnou a nekonkurenčnou ELISA. Priama ELISA, nepriama ELISA a sendvičová ELISA sú tri hlavné typy nekompetitívnej ELISA.

referencie:

1. Bio-Rad. „Druhy ELISA | Bio-Rad. " Bio, k dispozícii tu.
2. „Štyri typy ELISA“. Cusabio Life Science - váš biologický vedecký partner, k dispozícii tu.

S láskavým dovolením:

„Elisa tipus“ Autor: Carolfv333 - Vlastné dielo (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia.
“Sandwich Immunoassay, ELISA” od NickCT - Vlastná práca (CC BY-SA 3.0) prostredníctvom Commons Wikimedia

Veda a príroda