Rozdiel medzi HPLC a HPTLC

Kľúčový rozdiel - HPLC verzus HPTLC
 

Kľúčový rozdiel medzi HPLC a HPTLC je ten HPLC umožňuje kvantitatívne oddelenie zložiek vo vzorke, zatiaľ čo HPTLC neumožňuje kvantitatívne oddelenie zložiek vo vzorke.

Chromatografia je metóda fyzickej separácie, ktorá sa používa na oddelenie a identifikáciu zložiek v zmesi. HPLC aj HPTLC sú chromatografické techniky. HPLC je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia. HPTLC je vysoko výkonná chromatografia na tenkej vrstve.

OBSAH

1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je HPLC
3. Čo je HPTLC
4. Porovnanie bok po boku - HPLC vs HPTLC v tabuľkovej forme
5. Zhrnutie

Čo je to HPLC?

HPLC je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia. Je to analytická technika používaná na oddelenie, identifikáciu a kvantifikáciu zložiek v zmesi. Pri tejto technike sa vzorka rozpustí vo vhodnom rozpúšťadle. Potom sa rozpúšťadlo so vzorkou nechá prejsť pumpou s daným tlakom. Čerpadlo je naplnené pevným adsorbčným materiálom. Niektoré zložky sa potom pevne viažu na absorpčný materiál, zatiaľ čo iné sa voľne viažu. To spôsobuje, že komponenty majú rôzne prietoky cez čerpadlo. Preto sa komponenty dajú ľahko oddeliť.

Obrázok 01: HPLC systém

Adsorbčný materiál, ktorý plní čerpadlo, je známy ako stacionárna fáza. Rozpúšťadlo s rozpustenou vzorkou je známe ako mobilná fáza. Pumpa použitá v tejto technike sa nazýva stĺpec. Kolóna je naplnená adsorbčným materiálom, najčastejšie, časticami oxidu kremičitého. Veľkosť týchto častíc sa môže pohybovať od 2 do 50 um. Proces separácie je ovplyvňovaný zložením mobilnej fázy a teplotou systému. Interakcie medzi stacionárnou fázou a zložkou vo vzorke môžu byť hydrofóbne interakcie, dipól-dipólové interakcie, iónové väzby atď..

Prevádzkový tlak HPLC je podstatne vyšší ako pri tradičnej kvapalinovej chromatografii. Rozkladá sa okolo 50 - 350 barov. Rozdiel medzi kvapalinovou chromatografiou a HPLC je ten, že v kvapalinovej chromatografii vzorka padá cez kolónu pod gravitáciou, zatiaľ čo v HPLC je vzorka natlakovaná cez kolónu. Veľkosť kolóny a absorpčných častíc sú tiež veľmi malé v porovnaní s tradičnou kvapalinovou chromatografiou. Rozlíšenie dané technikou HPLC je však lepšie.

Čo je HPTLC?

HPTLC je vysoko výkonná chromatografia na tenkej vrstve. Je to pokročilá a automatizovaná forma tradičnej TLC. Táto technika poskytuje efektívne rozlíšenie v krátkom časovom období. Pri tejto metóde analýzy je možné analyzovať vzorku a referenciu súčasne, čo umožňuje porovnanie vzorky s referenciou. Poskytuje lepšiu analytickú presnosť ako iné chromatografické techniky. Čas potrebný na analýzu je kratší. Táto technika je lacná.

Obrázok 02: Analýza potravinárskych farbív pomocou HPTLC

Metóda HPTLC je jednoduchý proces a krok prípravy vzorky je tiež eliminovaný (v tradičnej TLC je krok prípravy vzorky zahrnutý pred separáciou. Tento krok zahŕňa čistenie a obohatenie). Rozpúšťadlo sa môže použiť priamo bez akéhokoľvek predbežného spracovania, hoci iné chromatografické techniky vyžadujú predbežné úpravy, ako je odplynenie, filtrácia atď..

Adsorpčný materiál používaný v HPTLC je oxid kremičitý s veľmi malými veľkosťami častíc. V tradičnej TLC je veľkosť častíc siliky 5 až 20 um, zatiaľ čo v HPTLC je to 4 až 8 um. Vzorka sa nanesie na dosku HPTLC pomocou aplikátora. Poskytuje jednotné a bezpečné použitie. Doštičky sa potom umiestnia do komory s mobilnou fázou. Komora by mala byť nasýtená parou mobilnej fázy. Po procese HPTLC je možné detegovať zistené miesta. Pri detekcii škvŕn na doske používa technika HPTLC vhodnú UV oblasť alebo jódovú komoru.

Aký je rozdiel medzi HPLC a HPTLC?

HPLC vs HPTLC
HPLC je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia.	HPTLC je vysoko výkonná chromatografia na tenkej vrstve.
technika
Pri HPLC sa mobilná fáza s rozpúšťadlom vedie cez kolónu naplnenú stacionárnou fázou.	V HPTLC sa vzorka nanesie na TLC platňu a umiestni sa do komory obsahujúcej mobilnú fázu; potom sa vzorka nechá migrovať nahor doštičku spolu s mobilnou fázou.
meranie
Pri HPLC sa na oddelenie zložiek vo vzorke používajú rozdiely medzi prietokmi zložiek cez kolónu.	V HPTLC sa rozdiely medzi vzdialenosťami prekonanými jednotlivými komponentmi vo vzorke používajú na oddelenie komponentov vo vzorke.
Kvantitatívne oddelenie
HPLC umožňuje kvantitatívne oddelenie zložiek vo vzorke.	HPTLC neumožňuje kvantitatívne oddelenie komponentov vo vzorke.

Zhrnutie - HPLC vs HPTLC

HPLC a HPTLC sú dve chromatografické techniky. Kľúčový rozdiel medzi HPLC a HPTLC je v tom, že HPLC umožňuje kvantitatívne oddelenie zložiek vo vzorke, zatiaľ čo HPTLC neumožňuje kvantitatívne oddelenie zložiek vo vzorke.

referencie:

1. „Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia“. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10. apríla 2018, k dispozícii tu.
2. „HPTLC“. LinkedIn SlideShare, 30. mája 2011, k dispozícii tu.

S láskavým dovolením:

1. „HPTLCplatetoMS“ od Kjaergaard na anglickej Wikipédii - prevedené z en.wikipedia na Commons (Public Domain) prostredníctvom Commons Wikimedia
2. „HPLC“ od PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud MorlockAsociácia profesora (Privatdozentin) University of HohenheimInštitút potravinárskej chémie - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Bibliografická služba 103 (2009) prostredníctvom Commons Wikimedia