Rozdiel medzi HPLC a LCMS

Kľúčový rozdiel - HPLC vs LCMS
 

Pozrime sa najprv na význam HPLC a LCMS pred analýzou rozdielu medzi HPLC a LCMS. Chromatografia je separačná technika v chemickej analýze, pri ktorej sa zložky vzorky počas priechodu cez chromatografické médium separujú. Zahŕňa tiež interakciu so vzorkou, stacionárnou fázou a mobilnou fázou. HPLC znamená Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia, a používa sa ako metóda kvapalinovej chromatografie v analytickej chémii. Kombinácia Kvapalinová chromatografia a hmotnostná spektroskopia (LCMS) bol vyvinutý pre kvantitatívnu analýzu vybraných biomolekúl a je vysoko citlivý, presný a špecifický testovací postup v porovnaní s HPLC. To je kľúčový rozdiel medzi HPLC a LCMC. Tento článok vás oboznámi s HPLC a LCMC, ktoré sa zaoberajú chemickou analýzou, a diskutuje o rozdieloch medzi HPLC a LCMS.

Čo je to HPLC?

Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) je populárna separačná technika v analytickej chémii. Je to hlavne používa sa na oddelenie zložiek, na identifikáciu a kvantifikáciu každej zložky v zmesi. Skôr bola táto metóda známa ako vysokotlaková kvapalinová chromatografia pretože to záviselo od čerpadiel, aby pretekalo stlačené kvapalné rozpúšťadlo obsahujúce zmes vzoriek cez kolónu naplnenú pevným adsorbčným materiálom. Každá zložka v zmesi vzoriek interaguje odlišne s pevným adsorbčným materiálom, čo vedie k rôznym prietokom pre rôzne zložky. To môže viesť k separácii zložiek, keď vytekajú z HPLC kolóny.

HPLC sa používa na rôzne účely aplikácie ako napr analýza hladín vitamínu D v krvi, nezákonné užívanie drog športovcami detekciou zvyškov liečiva v ich moči, triedenie zložiek komplexnej biologickej vzorky na výskumné účely a analýzy a výroba farmaceutických výrobkov.

Čo je LCMS?

Kvapalinová chromatografia-hmotnostná spektrometria (LCMS) je analytická technika, ktorá kombinuje fyzikálne separačné schopnosti kvapalinovej chromatografie s schopnosťami hmotnostnej analýzy hmotnostnej spektrometrie (MS). Kvapalinová chromatografia je separačná technika a na analýzu pomeru hmotnosti k nábojom nabitých častíc sa používa hmotnostná spektrometria. Fyzikálna separácia sa zvyčajne dosiahne pomocou HPLC a alternatívne, LCMS tiež známej ako HPLC-MS. LCMS je a dominantná analytická technika ktorý má veľmi vysoká presnosť, citlivosť a špecifickosť v porovnaní s HPLC. Preto je užitočný v mnohých aplikáciách, ako sú výskumné účely, analýza liečiv, analýza potravín, atď. LCMS je hlavne používa sa na oddelenie, detekciu, identifikáciu a kvantifikáciu biochemických vlastností konkrétnej vzorky v prítomnosti komplexných chemických zmesí.

Aký je rozdiel medzi HPLC a LCMC?

Skratka a definícia HPLC a LCMC

HPLC: HPLC znamená vysokovýkonná kvapalinová chromatografia. Je to separačná technika, ktorá sa používa hlavne na oddelenie zložiek, identifikáciu a kvantifikáciu každej zložky v zmesi.

LCMS: LCMS znamenáKvapalinová chromatografia a hmotnostná spektrometria. Je to analytická technika, ktorá kombinuje fyzikálne separačné schopnosti kvapalinovej chromatografie s schopnosťami hmotnostnej analýzy hmotnostnej spektrometrie (MS)..

Charakteristika HPLC a LCMC

klasifikácia

HPLC: Toto je iba metóda kvapalinovej chromatografie.

LCMS: Je to kombinácia metódy kvapalinovej chromatografie a metódy hmotnostnej spektrometrie.

efektívnosť

HPLC: V porovnaní s LCMS je analýza HPLC menej účinná a pomalšia.

LCMS: V porovnaní s HPLC je LCMS analýza efektívna a rýchlejšia.

citlivosť

HPLC: V porovnaní s LCMS je analýza HPLC menej citlivá.

LCMS: V porovnaní s HPLC je LCMS analýza citlivejšia.

špecifickosť

HPLC: V porovnaní s LCMS je analýza HPLC menej špecifická.

LCMS: V porovnaní s HPLC je LCMS analýza špecifickejšia.

presnosť

HPLC: HPLC poskytuje menej presné výsledky ako LCMS na stanovenie niektorých chemikálií.

LCMS: LCMS poskytuje presnejšie výsledky ako HPLC na stanovenie niektorých chemikálií.

komponentov

HPLC: HPLC sa môže považovať za súčasť LCMS.

LCMS: LCMS sa nemôže považovať za súčasť HPLC.

Zdroj iónov

HPLC: Iónový zdroj v prístroji HPLC neexistuje.

LCMS: Iónový zdroj je prítomný v LCMS prístroji.

aplikácia

HPLC: Ióny, polyméry, organické molekuly a biomolekuly môžu byť analyzované pomocou HPLC.

LCMS: Organické molekuly a biomolekuly môžu byť analyzované. Na rozdiel od HPLC sa LCMS môže použiť na skúmanie neúplne rozdelených zmesí.

operácie

HPLC: Schéma prístroja HPLC je znázornené na obrázku 1 a zvyčajne obsahuje autosampler, pumpy a detektor. Vzorkovač zavádza zmes vzoriek do mobilnej fázy (tlaková zmes rozpúšťadiel, ako je voda, acetonitril a / alebo metanol), ktorá ju prenáša na kolónu. Čerpadlá dodávajú požadovaný prietok a zloženie mobilnej fázy cez kolónu. Kolóna je naplnená adsorbentom, ktorým je zrnitá pevná látka, ako je oxid kremičitý alebo polyméry. Detektor vytvára signál úmerný množstvu prítomnosti zložky vzorky v kolóne, čo umožňuje kvantifikovateľnú analýzu vybratých zložiek vzorky. HPLC prístroj je riadený a analýza dát je zabezpečená digitálnym mikroprocesorom a užívateľským softvérom.

Postava 1: Schéma prístroja HPLC

LCMS: Schéma LCMS prístroja je na obrázku 2. Extrakt vzorky sa vloží do kolóny pozostávajúcej z HPLC. Tento stĺpec zachováva metabolity vzorky na základe fyzikálnych znakov a rôzne metabolity tečú do hmotnostného spektrometra v rôznych časových intervaloch. Hmotnostná spektroskopia sa používa na hodnotenie hmotností častíc, na stanovenie elementárneho usporiadania molekuly a na objasnenie štruktúr molekúl. Vzorka by sa však mala ionizovať, aby sa vytvorili nabité molekuly, aby sa stanovili ich pomery hmotnosť k nábojom. Preto namiesto nástrojov HPLC pozostávajú LCMS z ďalších troch modulov, ako je zdroj železa, hmotnostný analyzátor a detektor. Iónový zdroj môže transformovať vzorku plynnej fázy na ióny a analyzátor hmotnosti zoskupujúci ióny podľa ich hmotnosti pomocou elektromagnetických polí. Nakoniec detektor kvantifikuje hodnoty a dodáva údaje každého iónu prítomného vo vzorke. Technika LCMS sa môže použiť pre kvalitatívne aj kvantitatívne aplikácie.

  Obrázok 2: Schéma LCMS prístroja

Záverom možno povedať, že HPLC je metóda kvapalinovej chromatografie, zatiaľ čo LCMS je kombináciou kvapalinovej chromatografie a hmotnostnej spektrometrie. Obe tieto analytické techniky majú odlišné vlastnosti, môžu sa však použiť na identifikáciu a kvantifikáciu zloženia potravín, farmaceutických prípravkov a iných bioaktívnych molekúl..

Referencie Arpino, P. (1992). Kombinovaná kvapalinová chromatografia s hmotnostnou spektrometriou. Časť III. Aplikácie termosprejov. Recenzie hromadnej spektrometrie, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. a Spoendlin, C. (2004). Praktické aspekty vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie s reverznou fázou s použitím kolón s náplňou častíc 3 μm a monolitických kolón vo farmaceutickom vývoji a výrobe pracujúcich podľa súčasných správnych výrobných postupov. Chromatografický vestník, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. a Kerns, E. H. (1999). Aplikácie LC / MS vo vývoji liekov. Recenzie hromadnej spektrometrie, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Spojenie laserovej desorpcie / ionizácie pomocou matrice na separácie kvapalín. Recenzie hromadnej spektrometrie 16 (5): 283. Snímok so súhlasom autora: „Hplc“ od pôvodného používateľa, ktorý odovzdal video, bol Kjaergaard na en.wikipedia - prevedené z en.wikipedia. (Public Domain) prostredníctvom Commons