Rozdiel medzi HPLC a UPLC

kľúčový rozdiel medzi HPLC a UPLC je to HPLC umožňuje analýzu častíc s veľkosťou okolo 5 mikrometrov, zatiaľ čo UPLC umožňuje oveľa menšie častice okolo 2 mikrometrov.

HPLC aj UPLC sú kvapalinové chromatografické techniky, ktoré sú užitočné pri separácii zložiek zlúčeniny. Aby sme poznali rozdiel medzi HPLC a UPLC, musíme najprv vedieť, čo je HPLC. Je to preto, že UPLC je špeciálna verzia HPLC a môžeme ju ľahko pochopiť, ak vieme, čo je HPLC.

OBSAH

1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je HPLC
3. Čo je UPLC
4. Porovnanie bok po boku - HPLC vs UPLC v tabuľkovej forme
5. Zhrnutie

Čo je to HPLC?

Výraz HPLC znamená High Performance Kvapalinová chromatografia. Je to technika, ktorú môžeme použiť na oddelenie rôznych zložiek zlúčeniny. Je to tiež najpoužívanejšia technika na identifikáciu, kvantifikáciu a oddelenie zložiek zmesi. Okrem toho táto technika využíva vysoký tlak na tlačenie rozpúšťadiel cez kolónu. Ďalej, hlavné aplikácie HPLC sú v biochémii pre analýzu zložiek zlúčeniny. Je to ideálny spôsob separácie a identifikácie aminokyselín, nukleových kyselín, proteínov, uhľovodíkov, pesticídov, uhľohydrátov, antibiotík, steroidov a nespočetných ďalších anorganických látok..

Obrázok 01: HPLC systém v laboratóriu

Stručne povedané, spôsob fungovania techniky HPLC je nasledujúci. Po prvé, mali by sme zaviesť vzorku do prúdu mobilnej fázy v diskrétnych malých množstvách pomocou pumpy. Tlak čerpadla by sa mal udržiavať na hodnote 40 MPa. Potom tento prúd mobilnej fázy presakuje kolónou HPLC. Zložky vo vzorke tiež prechádzajú cez kolónu. Ich rýchlosť pohybu sa však navzájom líši. Tento rozdiel vzniká v dôsledku rozdielu v interakciách medzi zložkami vzorky a adsorbentom vo vnútri kolóny. Tento adsorbent nazývame stacionárnou fázou, pretože sa nachádza vo vnútri kolóny (nepohybuje sa). Po druhé, na konci stĺpca môžeme zhromaždiť vzorku, ktorá sa eluuje zo stĺpca. Tam môžeme určiť rozdiely v retenčných časoch pre každú zložku vo vzorke.

Čo je to UPLC?

Výraz UPLC znamená Veľmi výkonná kvapalinová chromatografia. Je to variácia HPLC, ale spôsob práce je rovnaký. Na rozdiel od HPLC však táto metóda umožňuje analyzovať veľmi malé častice, ako sú malé mikrometre 2 mikrometre.

Obrázok 02: Zariadenie UPLC

Okrem toho poskytuje rýchlejšiu analýzu. V tejto technike používame tlak čerpadla 100 MPa na vloženie vzorky do kolóny. Tento vysoký tlak teda potvrdzuje, že celá vzorka sa zavedie do kolóny. To je teda veľmi účinné v porovnaní s HPLC.

Aký je rozdiel medzi HPLC a UPLC?

Pojem HPLC znamená vysokoúčinná kvapalinová chromatografia, zatiaľ čo pojem UPLC označuje vysokoúčinnú kvapalinovú chromatografiu. Technika UPLC je preto rozvinutou verziou HPLC. Spôsob prevádzky je teda rovnaký pre obidve techniky. UPLC je však v porovnaní s HPLC účinnejší, pretože používa vysoký tlak v pumpe; tlak pumpy pre HPLC je 40 MPA, zatiaľ čo pre UPLC je 100 MPa. Preto je to rozdiel medzi HPLC a UPLC. Hlavným rozdielom medzi HPLC a UPLC je predovšetkým to, že HPLC umožňuje analýzu častíc s veľkosťou okolo 5 mikrometrov, zatiaľ čo UPLC umožňuje oveľa menšie častice okolo 2 mikrometrov..

Zhrnutie - HPLC vs UPLC

UPLC je forma HPLC. Spôsoby operácie sú teda rovnaké. V porovnaní s HPLC však nájdeme niektoré vylepšené funkcie v UPLC. Preto existuje určitý rozdiel medzi HPLC a UPLC. Kľúčovým rozdielom medzi HPLC a UPLC je však to, že HPLC umožňuje analýzu častíc s veľkosťou okolo 5 mikrometrov, zatiaľ čo UPLC umožňuje oveľa menšie častice okolo 2 mikrometrov..

referencie:

1. „Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia“. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20. októbra 2018. K dispozícii tu
2. „UPLC.“ Wikipedia, Wikimedia Foundation, 25. októbra 2017. K dispozícii tu  

S láskavým dovolením:

1. ”Hplc” Autor: Kjaergaard na anglickej Wikipédii (Public Domain) prostredníctvom Commons Wikimedia 
2. ”Obrázok zariadenia UPLC” Autor Groep29 BFW - Vlastné dielo, (Public Domain), na Commons Wikimedia