Rozdiel medzi imunocytochémiou a imunohistochémiou

Kľúčový rozdiel - imunocytochémia vs imunohistochémia
 

Imunocytochémia (ICC) a imunohistochémia (IHC) sú dve široko používané techniky molekulárnej diagnostiky, ktorá identifikuje a potvrdzuje výskyt nekomunikovateľných aj prenosných chorôb na základe molekulárnych markerov prítomných v bunkách. Kľúčovým rozdielom imunocytochémie a imunohistochémie je molekula, ktorá sa v týchto technikách používa ako analytický postup.. V ICC sa používajú primárne a sekundárne protilátky konjugované so značkami, ako je fluorescencia, zatiaľ čo IHC, monoklonálne a polyklonálne protilátky sa používajú na diagnostické stanovenia..

OBSAH

1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je to imunocytochémia
3. Čo je imunohistochémia
4. Podobnosti medzi imunocytochémiou a imunohistochémiou
5. Porovnanie bok po boku - imunocytochémia vs imunohistochémia v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie

Čo je imunocytochémia (ICC)?

ICC používa primárne a sekundárne protilátky naviazané na markery, ako sú fluorescenčné markery alebo enzýmy, a je to účinný spôsob detekcie na detekciu antigénov prítomných na cieľových bunkách, ktorými môžu byť buď infekčné bunkové častice alebo rakovinové nádorové bunky. Na imunocytochémiu sú potrebné tri typy kontrol.

• Primárna protilátka - kontrola, ktorá ukazuje špecifickosť väzby primárnej protilátky na antigén
• Sekundárna protilátka - kontrola, ktorá ukazuje, že značka je špecifická pre primárnu protilátku
• Kontroly štítkov - ukazujú, že označenie je výsledkom pridaného označenia a nie výsledkom endogénneho označovania.

Obrázok 01: Imunocytochémia označuje jednotlivé proteíny v bunkách (tu je tyrozínhydroxyláza v axónoch sympatických autonómnych neurónov znázornená zelenou farbou).

Primárna kontrola protilátok je špecifická pre každú novú protilátku a nemôže sa opakovať pre každý experiment. Sekundárna kontrola protilátok je navrhnutá na základe primárnej protilátky použitej v experimente a je súčasťou každého experimentu. Kontrola označovania je zahrnutá, ak sa zmení stav postupu, vzorka sa zmení alebo ak sa zistí neočakávané označenie.

Dve hlavné aplikácie ICC sú rádioimunologický test (RIA) a enzýmový imunologický test (ELISA). Najbežnejšou použitou protilátkou je imunoglobulín G.

Čo je imunohistochémia (IHC)?

V imunohistochémii obsahuje vzorka zdroja monoklonálne a polyklonálne protilátky, aby sa stanovila prítomnosť antigénov v cudzích bunkách. Táto technika je založená na špecifickej reakcii väzby antigén-protilátka. Protilátky použité pri detekcii môžu byť označené rôznymi značkami; môžu to byť fluorescenčné markery, rádioaktívne značené markery alebo chemické markery. Prostredníctvom uľahčenia in vitro väzba medzi antigénom a cielenou protilátkou, môže byť stanovená prítomnosť alebo neprítomnosť konkrétneho proteínu bunky.

Obrázok 02: Imunohistochemické farbenie normálnej obličky CD10

V súčasnosti sa vedci podieľajú na vývoji cieľových protilátok proti špecifickým antigénom prítomným v bunkách, ktoré sa môžu vyvinúť ako malígne nádorové bunky alebo antigény prítomné v infekčných agensoch, ako je HIV..

Aké sú podobnosti medzi imunocytochémiou a imunohistochémiou?

• Reakcie sú vysoko špecifické a presné v ICC a IHC.
• Medzi aplikácie ICC a IHC patrí diagnostika rakoviny a infekčných chorôb.
• Sterilné podmienky by sa mali udržiavať v oboch podmienkach a mali by sa vykonávať v roku 2006 in vitro
• Obe techniky poskytujú reprodukovateľné výsledky.
• Obe sú rýchle.
• Rádioaktívne značenie a fluorescenčné techniky sa používajú ako detekčné metódy v ICC aj IHC.
• Obe sú založené na párovaní antigén-protilátka.

Aký je rozdiel medzi imunocytochémiou a imunohistochémiou?

Imunocytochémia (ICC) vs imunohistochémia (IHC)
ICC používa markery naviazané na primárne a sekundárne protilátky, ako napríklad fluorescenčné markery alebo enzýmy, a je účinnou detekčnou metódou na detekciu antigénov prítomných v cieľových bunkách..	IHC je metóda, ktorá využíva monoklonálne a polyklonálne protilátky na stanovenie prítomnosti antigénov, ktoré sú špeciálnymi proteínovými markermi umiestnenými na bunkových povrchoch..
Vzorový zdroj
Vzorky získané z tkanív, ktoré boli histologicky spracované na tenké rezy, sa používajú v ICC.	IHC používa vzorky pozostávajúce z buniek pestovaných v monovrstve alebo buniek v suspenzii, ktoré sú uložené na podložnom sklíčku.
Spracovanie vzorky
V ICC by bunky mali byť priepustné, aby sa uľahčila penetrácia protilátok do vnútrobunkových cieľov.	V IHC sú bunky fixované formalínom, zafarbené v parafíne pred farbením.

Zhrnutie - imunocytochémia vs imunohistochémia

Molekulárna diagnostika sa používa na identifikáciu a potvrdenie výskytu neprenosných chorôb a prenosných chorôb na základe molekulárnych markerov prítomných v bunkách. Molekulárne markery môžu byť proteíny alebo sekvencie DNA alebo RNA; vývoj technológií, ako sú ICC a IHC, pripravil vedcom cestu na identifikáciu choroby a jej príčiny v ranom štádiu. ICC aj IHC závisí od špecifických reakcií medzi protilátkou a antigénom, hoci zdroj vzorky. Hlavným rozdielom medzi imunocytochémiou a imunohistochémiou je spracovanie vzoriek týchto dvoch postupov.

Stiahnite si verziu imunocytochémie vo formáte PDF verzus imunohistochémia

Môžete si stiahnuť verziu tohto článku vo formáte PDF a použiť ju na účely offline podľa citácie. Stiahnite si PDF verziu tu Rozdiel medzi imunocytochémiou a imunohistochémiou.

Referencie:

1. Burry, Richard W. „Kontroly pre imunocytochémiu: aktualizácia“. Journal of Histochemistry and Cytochemistry, SAGE Publications, Jan. 2011, dostupné tu. Prístup k 24. augustu 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha a kol. „Aplikácie imunohistochémie“. Vestník farmaceutických a biologických vied, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, august 2012, k dispozícii tu. Prístup k 24. augustu 2017.

S láskavým dovolením:

1. „Imunohistochémia“ Autor Swharden - Vlastná práca (CC BY-SA 3.0) prostredníctvom Commons Wikimedia
2. „Obličky cd10 ihc“ od Nephrona - Vlastné dielo (CC BY-SA 3.0) cez Commons Wikimedia