Tkanivová kultúra je metodika, ktorá sa používa na vyvolanie rastu buniek, ktoré sú oddelené od organizmu a sú pestované v rôznych kultivačných médiách. V tkanivovej kultúre zohrávajú kultivačné médiá dôležitú úlohu. Rôzne bunky rastú v rôznych kultivačných médiách v závislosti od fyziologických a chemických vlastností buniek. Monovrstvová kultúra a suspenzná kultúra sú dva hlavné typy kultúr, ktoré sa používajú v procese tkanivovej kultúry. Monovrstvová kultúra je závisí od ukotvenia kultúra, kde bunka rastie, zatiaľ čo je pripojená k substrátu a suspenzná kultúra je kotvisko nezávislá kultúra, kde sa bunkové agregáty používajú na vytvorenie bunkových kultúr v tekutom médiu. To je kľúčový rozdiel medzi jednovrstvovou kultúrou a suspenznou kultúrou.
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je to monovrstvová kultúra
3. Čo je kultúra pozastavenia
4. Podobnosti medzi monovrstvou a suspenznou kultúrou
5. Porovnanie bok po boku - monovrstva verzus kultúra suspenzie v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie
Monovrstvová kultúra je definovaná ako typ kultúry, v ktorej sú bunky kultivované v jednej vrstve na banke alebo Petriho miske obsahujúcej kultivačné médium. Monovrstvová kultúra sa tiež označuje ako adherentná kultúra alebo kultúra závislá od ukotvenia. Dôvodom odkazu na adherentnú kultúru alebo kultúru závislú od ukotvenia je skutočnosť, že tieto bunky potrebujú substrát na pripojenie počas svojho rastu. Prichytávajú sa k bunkovej kultúre obsahujúcej substrát.
Substráty, ktoré sa používajú v kultivačnom médiu, by sa mali pred použitím nabiť. Tieto nabité substráty podporujú interakcie medzi bunkami. Zdroje, ktoré sa používajú na nabíjanie týchto substrátov, sú elektrické výbojky iónov, dvojmocné katiónové povlaky a žiarenie gama. V monovrstvovom kultivačnom médiu, keď sú bunky naočkované, je rast regulovaný pomocou procesu nazývaného kontaktná inhibícia. Počas inhibície kontaktu je bunkový rast zastavený, aby zastavil proliferáciu normálnych buniek, keď vytvorili monovrstvu pripojenú k povrchu..
Obrázok 01: Adherentná kultúra
Bunky závislé od iných substrátov sa označujú ako adherentné bunky. Tieto adherentné bunky sú často odvodené z orgánových tkanív, ako sú napríklad obličky, atď. Tieto bunky sú imobilné a typicky sa pripájajú k spojivovému tkanivu. Preto by sa pri pestovaní týchto buniek na kultivačnom médiu mali poskytovať všetky tieto základné rastové faktory. Dôležitosť monovrstvovej kultúry je, že napodobňuje pôvodné prírodné podmienky, aby sa bunka správne usadila.
Suspenzná kultúra by sa mohla definovať ako typ kultúry, v ktorej dochádza k množeniu malého agregátu buniek alebo jednotlivých buniek suspendovaných v kvapalnom médiu, ktoré je neustále pretrepávané. Inými slovami, suspenzná kultúra je tiež známa ako bunková kultúra bunkovej suspenznej kultúry. Táto kultúra pomáha pri zakladaní jednobunkových kultúr, ktoré by sa mohli využiť pri skúmaní rastlinných buniek s ohľadom na ich rozdielny potenciál a vlastnosti. Skúmanie tohto aspektu by sa mohlo využiť na pochopenie vzájomných vzťahov medzi bunkami a ich vplyvov, pokiaľ ide o mnohobunkové organizmy.
Počas počiatočného vývoja rastlín sa vytvára kalus, ktorý je hmotnosťou nediferencovaných buniek. Táto úroveň rastu spôsobuje prekážky pri identifikácii bunkových udalostí počas fázy rastu a vývoja rastliny. Na prekonanie tejto situácie sa zaviedla suspenzná kultúra, pretože poskytla vynikajúce kultivačné médium na vytvorenie jednotlivých bunkových kultúr z malých bunkových agregátov získaných z kalusu. To sa využilo na štúdium rôznych morfologických a biochemických aspektov v počiatočných fázach vývoja rastliny.
Obrázok 02: Kultúra suspenzie
V kontexte získania ideálnej bunkovej kultúry je typickou metódou prenos drobivej hmoty kalusu do agitovaného tekutého média, kde sa hmota ľahko rozpadne a disperguje. Potom sa veľké kalusy preosejú, pričom sa zachovajú agregáty malých buniek a jednotlivé bunky. buniek. Potom sa tieto bunky prenesú do iného média. Aktívne rastúce bunky sa získajú po dvoch až troch týždňoch.
Monovrstva verzus kultúra pozastavenia | |
Monovrstvová kultúra je kultúra závislá od ukotvenia, kde bunky rastú, keď sú pripojené k substrátu. | Suspenzná kultúra je kultúra nezávislá od ukotvenia, pri ktorej dochádza k množeniu malých agregátov buniek alebo jednotlivých buniek suspendovaných v tekutom médiu, ktoré je pretrepávané.. |
požiadavky | |
Monovrstvová kultúra vyžaduje nádobu ošetrenú tkanivovou kultúrou s periodickým pasážovaním. | Suspenznú kultúru je možné dosiahnuť pomocou nádob bez tkanivovej kultúry. |
Obmedzenia rastu | |
Rast monovrstvovej kultúry bude obmedzený povrchovou plochou, ktorá priamo ovplyvňuje výťažok. | Rastové obmedzenie suspenznej kultúry sa uskutočňuje koncentráciou buniek v médiu. |
Bunková disociácia | |
Bunková disociácia prebieha mechanicky alebo enzymaticky v monovrstvovej kultúre. | Kultúra suspenzie nevyžaduje disociáciu buniek pomocou enzýmov a mechanických prostriedkov. |
Vizualizácia buniek | |
Monovrstvová kultúra umožňuje ľahkú vizualizáciu buniek. | Je ťažké vidieť bunky v suspenzných kultúrach. |
funkcie | |
Monovrstvová kultúra sa používa v oblasti cytologie, výskumu a nepretržitého zberu produktov. | Suspenzná kultúra sa používa na hromadnú produkciu proteínov, výskumné štúdie a šaržový zber. |
Monovrstvová kultúra a suspenzná kultúra sú dve hlavné kultúry používané v tkanivovej kultúre. Monovrstvová kultúra je kultúra závislá od ukotvenia. Bunky sa pestujú v tejto kultúre, kde sú pripojené k substrátu prítomnému v kultúre. Substráty sa pred použitím nabijú za účasti rôznych zdrojov, ako sú dvojmocné povlaky a iónový výboj. Kultúry suspenzie sú kultúry nezávislé od ukotvenia, kde bunky rastú bez pomoci substrátu na pripojenie. Táto kultúra pomáha pri zakladaní jednobunkových kultúr, ktoré by sa mohli využiť pri skúmaní rastlinných buniek s ohľadom na ich rozdielny potenciál a vlastnosti. Toto je rozdiel medzi jednovrstvovou kultúrou a suspenznou kultúrou.
1. „Kultúra suspenzie buniek: definícia, zásada, protokol a význam | Rastlinné tkanivo. “ Diskusia o biológii, 26. októbra 2015. K dispozícii tu
2. „Adherentné a suspenzné bunkové kultúry.“ Study.com, Study.com. K dispozícii tu
1.'Kultúrna kultúra na PNIPAM'By Guillaume Paumier (užívateľ: guillom) - vlastná práca, (CC BY-SA 3.0) prostredníctvom Commons Wikimedia
2.'Sphagnum palustre v Bioreactor'By ReskiLab, (CC BY-SA 3.0) prostredníctvom Commons Wikimedia