Rozdiel medzi RT-PCR a QPCR

Reverzná transkripčná polymerázová reťazová reakcia (RT-PCR)

RT-PCR vs. QPCR

Pokroky v biotechnológii viedli v priebehu rokov k objaveniu niekoľkých spôsobov, ako sa vyrovnať s požiadavkami na transplantácie orgánov. Predtým, jednotlivec, ktorý by dobrovoľne daroval akýkoľvek orgán bezprostredne po smrti pacientovi, ktorý to potrebuje, mohol operáciu pre transplantáciu iba začať. Nepretržité štúdie a výskum biológov vedú k objavu kmeňových buniek.

Kmeňové bunky sa týkajú buniek, ktoré sú odobraté z DNA embrya, ktoré bude slúžiť ako zdroj pre regeneráciu buniek, ktoré by boli v podstate klonom orgánu, v ktorom bola získaná DNA. Zatiaľ čo aktivisti za ľudské práva lobujú za zastavenie takýchto postupov, úspešné operácie skutočne preukázali účinnosť vývoja kmeňových buniek v transplantáciách orgánov..

Predtým, ako si človek môže uvedomiť a plne porozumieť kmeňovým bunkám, je potrebné oboznámiť sa s rôznymi terminológiami spojenými s týmto vedeckým objavom. Kultivácia kmeňových buniek sa zaoberá DNA a jej kódovaním. Preto je dôležité, aby študenti alebo jednotlivci, ktorí sa zaujímajú o oblasť, rozlišovali medzi RT-PCR a qPCR.

Reverzná transkripčná polymerázová reťazová reakcia (RT-PCR) je jednou z mnohých variantov polymerázovej reťazovej reakcie alebo PCR. Táto laboratórna technika je široko používaná v molekulárnej biológii, aby vedci mohli produkovať viacnásobné kópie konkrétnej sekvencie DNA prostredníctvom procesu vytvoreného ako „amplifikácia“. Rozdiel medzi RT-PCR a tradičnou PCR spočíva v tom, že RNA sa najprv transkribuje opačne do svojho DNA doplnku, ktorý využíva reverznú transkriptázu. Nová komplementárna DNA obsahujúca reverznú transkripciu sa potom amplifikuje pomocou tradičnej PCR alebo PCR v reálnom čase.

Väčšina študentov študujúcich tento proces často urobí chybu pri výmene PCR s reverznou transkripciou a PCR v reálnom čase, pretože obaja sú podobne skrátení. Aby sa predišlo nejasnostiam, biológovia označujú PCR v reálnom čase ako kvantitatívne PCR v reálnom čase alebo qPCR.

QPCR sa výrazne líši od RT-PCR, pretože qPCR je zodpovedný za meranie amplifikácie, keď k nej dôjde. Dá sa povedať, že RT-PCR začína proces amplifikácie, zatiaľ čo qPCR ho meria podľa postupu.

Kvantitatívna PCR v reálnom čase

QPCR skutočne prevratil tradičnú metódu jednosmerného prístupu, pokiaľ ide o kvantifikáciu DNA a RNA, pretože použitie metódy qPCR umožňuje biológom určiť počiatočnú koncentráciu nukleovej kyseliny ešte pred pozorovaním výsledkov reakcie a poznamenal si.

Aplikácia qPCR, ktorá sa v súčasnosti považuje za najúčinnejšiu a najcitlivejšiu analytickú techniku ​​pre genetické štúdie, sa výrazne rozšírila. V súčasnosti sa podieľa na kvantitatívnej analýze génovej expresie, genotypizácii, detekcii patogénov a analýze SNP, spolu s meraniami interferencie s RNA..

QPCR sa často kombinuje s procesom reverznej transkripcie na kvantifikáciu messengerovej RNA a MicroRNA prítomnej v bunkách tkanív pozorovaných a experimentovaných. Toto potom dáva ďalší viditeľný rozdiel medzi týmito dvoma: RT-PCR sa môže použiť na proces amplifikácie, ale musí sa fúzovať s qPCR na účely kvantifikácie..

Je tiež známe, že QPCR je viac kvantitatívny, pretože údaje sa môžu zbierať ako postupuje exponenciálna rastová (log) fáza PCR. Biológovia poznamenávajú, že množstvo vedľajšieho produktu PCR je priamo úmerné množstvu templátovej nukleovej kyseliny, ktorá sa bude merať prostredníctvom qPCR..

Na druhej strane RT-PCR zďaleka nemá kvantitatívny charakter, pretože pozorovanie intenzity amplifikovaného pruhu na géli podľa stanoveného štandardu koncentrácie môže viesť k „semikvantitatívnemu“ záveru.

Zhrnutie:

1.QPCR a RT-PCR sú pojmy používané v biotechnológii a používajú sa na výrobu viacerých kópií DNA.
2.RT-PCR sa používa na zosilnenie reverznej transkripcie kódu DNA; QPCR meria amplifikáciu.
3.RT-PCR je na amplifikáciu, zatiaľ čo qPCR je na kvantifikáciu.
4.QPCR má kvantitatívny charakter, zatiaľ čo RT-PCR nie.